Номера | Оператор | Регион |
963-000xxxx | Билайн | Кировская область |
963-001xxxx 002xxxx 003xxxx 004xxxx 005xxxx 006xxxx 007xxxx 008xxxx 009xxxx 010xxxx | Билайн | Курганская область |
963-011xxxx 012xxxx 013xxxx 014xxxx 015xxxx 016xxxx 017xxxx 018xxxx 019xxxx 020xxxx | Билайн | Пермский край |
963-021xxxx 022xxxx 023xxxx 024xxxx 025xxxx | Билайн | Республика Коми |
963-026xxxx 027xxxx 028xxxx 029xxxx 030xxxx | Билайн | Республика Удмуртия |
963-031xxxx 032xxxx 033xxxx 034xxxx 035xxxx 036xxxx 037xxxx 038xxxx 039xxxx 04xxxxx 050xxxx 051xxxx 052xxxx 053xxxx 054xxxx 055xxxx | Билайн | Свердловская область |
963-056xxxx 057xxxx 058xxxx 059xxxx 060xxxx 061xxxx | Билайн | Тюменская область |
963-062xxxx 063xxxx 064xxxx 065xxxx 066xxxx | Билайн | Республика Удмуртия |
963-067xxxx 068xxxx 069xxxx | Билайн | Тюменская область |
963-070xxxx 071xxxx 072xxxx | Билайн | Ханты-Мансийский АО |
963-073xxxx 074xxxx 075xxxx 076xxxx 077xxxx 078xxxx 079xxxx 08xxxxx 090xxxx 091xxxx 092xxxx 093xxxx 094xxxx 095xxxx 096xxxx 097xxxx | Билайн | Челябинская область |
963-098xxxx 099xxxx 10xxxxx 110xxxx 111xxxx | Билайн | Пензенская область |
963-112xxxx 113xxxx 114xxxx | Билайн | Саратовская область |
963-115xxxx 116xxxx 117xxxx 118xxxx 119xxxx | Билайн | Самарская область |
963-120xxxx 121xxxx 122xxxx 123xxxx 124xxxx 125xxxx | Билайн | Республика Татарстан |
963-126xxxx 127xxxx | Билайн | Республика Марий Эл |
963-128xxxx 129xxxx | Билайн | Ульяновская область |
963-130xxxx 131xxxx 132xxxx 133xxxx 134xxxx 135xxxx 136xxxx 137xxxx 138xxxx | Билайн | Республика Башкортостан |
963-139xxxx | Билайн | Республика Татарстан |
963-140xxxx 141xxxx 142xxxx 143xxxx 144xxxx | Билайн | Республика Башкортостан |
963-145xxxx 146xxxx 147xxxx 148xxxx 149xxxx | Билайн | Республика Мордовия |
963-150xxxx 151xxxx 152xxxx | Билайн | Ивановская область |
963-153xxxx 154xxxx | Билайн | Тверская область |
963-155xxxx 156xxxx | Билайн | Челябинская область |
963-157xxxx 158xxxx | Билайн | Республика Татарстан |
963-159xxxx | Билайн | Тамбовская область |
963-160xxxx 161xxxx 162xxxx 163xxxx 164xxxx | Билайн | Краснодарский край |
963-165xxxx 166xxxx 167xxxx 168xxxx 169xxxx | Билайн | Кабардино-Балкарская Республика |
963-170xxxx 171xxxx | Билайн | Карачаево-Черкесская Республика |
963-172xxxx 173xxxx 174xxxx 175xxxx | Билайн | Республика Ингушетия |
963-176xxxx 177xxxx 178xxxx 179xxxx | Билайн | Республика Северная Осетия |
963-18xxxxx 190xxxx 191xxxx 192xxxx | Билайн | Красноярский край |
963-193xxxx 194xxxx 195xxxx 196xxxx 197xxxx | Билайн | Томская область |
963-198xxxx 199xxxx | Билайн | Республика Алтай |
963-200xxxx | Билайн | Архангельская область |
963-201xxxx | Билайн | Республика Хакасия |
963-202xxxx 203xxxx 204xxxx 205xxxx 206xxxx 207xxxx 208xxxx 209xxxx | Билайн | Республика Тыва |
963-210xxxx 211xxxx 212xxxx 213xxxx | Билайн | Брянская область |
963-214xxxx 215xxxx 216xxxx | Билайн | Ивановская область |
963-217xxxx 218xxxx | Билайн | Костромская область |
963-219xxxx 220xxxx 221xxxx 222xxxx | Билайн | Тверская область |
963-223xxxx 224xxxx 225xxxx 226xxxx 227xxxx 228xxxx | Билайн | Тульская область |
963-229xxxx | Билайн | Челябинская область |
963-230xxxx 231xxxx 232xxxx 233xxxx | Билайн | Нижегородская область |
963-234xxxx | Билайн | Ульяновская область |
963-235xxxx 236xxxx 237xxxx 238xxxx | Билайн | Республика Башкортостан |
963-239xxxx | Билайн | Республика Марий Эл |
963-240xxxx | Билайн | Новгородская область |
963-241xxxx 242xxxx 243xxxx 244xxxx 245xxxx 246xxxx 247xxxx 248xxxx 249xxxx | Билайн | Санкт-Петербург |
963-250xxxx 251xxxx 252xxxx 253xxxx | Билайн | Республика Тыва |
963-254xxxx 255xxxx 256xxxx 257xxxx 258xxxx 259xxxx 26xxxxx | Билайн | Красноярский край |
963-270xxxx 271xxxx 272xxxx 273xxxx 274xxxx 275xxxx | Билайн | Свердловская область |
963-276xxxx | Билайн | Кировская область |
963-277xxxx 278xxxx 279xxxx | Билайн | Курганская область |
963-280xxxx 281xxxx | Билайн | Кабардино-Балкарская Республика |
963-282xxxx 283xxxx 284xxxx 285xxxx 286xxxx 287xxxx 288xxxx | Билайн | Карачаево-Черкесская Республика |
963-289xxxx | Билайн | Сахалинская область |
963-29xxxxx | Билайн | Калининградская область |
963-30xxxxx 31xxxxx 32xxxxx | Билайн | Санкт-Петербург |
963-330xxxx 331xxxx 332xxxx 333xxxx 334xxxx | Билайн | Новгородская область |
963-335xxxx 336xxxx 337xxxx 338xxxx 339xxxx | Билайн | Псковская область |
963-34xxxxx | Билайн | Санкт-Петербург |
963-350xxxx 351xxxx | Билайн | Калининградская область |
963-352xxxx 353xxxx 354xxxx 355xxxx 356xxxx 357xxxx | Билайн | Вологодская область |
963-358xxxx 359xxxx 360xxxx 361xxxx 362xxxx 363xxxx 364xxxx 365xxxx | Билайн | Мурманская область |
963-366xxxx 367xxxx 368xxxx 369xxxx | Билайн | Новгородская область |
963-370xxxx 371xxxx 372xxxx 373xxxx 374xxxx 375xxxx | Билайн | Республика Дагестан |
963-376xxxx 377xxxx 378xxxx | Билайн | Республика Северная Осетия |
963-379xxxx | Билайн | Краснодарский край |
963-38xxxxx | Билайн | Ставропольский край |
963-390xxxx 391xxxx 392xxxx 393xxxx 394xxxx | Билайн | Кабардино-Балкарская Республика |
963-395xxxx 396xxxx 397xxxx | Билайн | Чеченская Республика |
963-398xxxx 399xxxx | Билайн | Республика Ингушетия |
963-40xxxxx 41xxxxx 42xxxxx | Билайн | Республика Дагестан |
963-430xxxx 431xxxx 432xxxx 433xxxx 434xxxx | Билайн | Кировская область |
963-435xxxx 436xxxx 437xxxx 438xxxx 439xxxx | Билайн | Курганская область |
963-44xxxxx | Билайн | Свердловская область |
963-45xxxxx | Билайн | Тюменская область |
963-46xxxxx 47xxxxx | Билайн | Челябинская область |
963-480xxxx 481xxxx 482xxxx 483xxxx 484xxxx | Билайн | Республика Удмуртия |
963-485xxxx 486xxxx 487xxxx 488xxxx 489xxxx | Билайн | Республика Коми |
963-490xxxx 491xxxx 492xxxx 493xxxx 494xxxx 495xxxx | Билайн | Ханты-Мансийский АО |
963-496xxxx 497xxxx 498xxxx 499xxxx | Билайн | Ямало-Ненецкий АО |
963-50xxxxx | Билайн | Алтайский край |
963-510xxxx 511xxxx 512xxxx 513xxxx 514xxxx | Билайн | Республика Алтай |
963-515xxxx 516xxxx | Билайн | Приморский край |
963-517xxxx 518xxxx 519xxxx 52xxxxx 53xxxxx | Билайн | Алтайский край |
963-54xxxxx | Билайн | Республика Удмуртия |
963-550xxxx 551xxxx 552xxxx 553xxxx 554xxxx | Билайн | Кировская область |
963-555xxxx 556xxxx 557xxxx 558xxxx 559xxxx | Билайн | Республика Коми |
963-562xxxx 563xxxx 564xxxx 565xxxx 566xxxx 567xxxx 568xxxx | Билайн | Хабаровский Край |
963-569xxxx | МТТ | Ростовская область |
963-57xxxxx | Билайн | Алтайский край |
963-58xxxxx 59xxxxx | Билайн | Чеченская Республика |
963-600xxxx 601xxxx 602xxxx 603xxxx 604xxxx 605xxxx 606xxxx 607xxxx 608xxxx 609xxxx 61xxxxx 62xxxxx 63xxxxx 640xxxx 641xxxx 642xxxx 643xxxx 644xxxx 645xxxx 6460xxx 6461xxx 6462xxx 6463xxx 6464xxx 6465xxx 6466xxx 6467xxx 6468xxx | Билайн | Москва |
963-6469xxx | Билайн | Вологодская область |
963-647xxxx 648xxxx 649xxxx 65xxxxx 66xxxxx 67xxxxx 68xxxxx 69xxxxx | Билайн | Москва |
963-70xxxxx | Билайн | Чеченская Республика |
963-71xxxxx 72xxxxx | Билайн | Москва |
963-730xxxx 731xxxx 732xxxx 733xxxx 734xxxx 735xxxx 736xxxx | Билайн | Вологодская область |
963-737xxxx 738xxxx | Билайн | Калининградская область |
963-74xxxxx | Билайн | Республика Карелия |
963-75xxxxx 76xxxxx 77xxxxx 78xxxxx | Билайн | Москва |
963-79xxxxx | Билайн | Республика Дагестан |
963-80xxxxx 81xxxxx | Билайн | Амурская область |
963-82xxxxx | Билайн | Хабаровский Край |
963-830xxxx 831xxxx 832xxxx 833xxxx 834xxxx 835xxxx | Билайн | Камчатский край |
963-836xxxx 837xxxx 838xxxx 839xxxx | Билайн | Приморский край |
963-840xxxx 841xxxx | Билайн | Хабаровский Край |
963-842xxxx 843xxxx 844xxxx 845xxxx 846xxxx 847xxxx 848xxxx 849xxxx | Билайн | Амурская область |
963-850xxxx 851xxxx 852xxxx 853xxxx 854xxxx 855xxxx 856xxxx 857xxxx | Билайн | Свердловская область |
963-858xxxx 859xxxx 860xxxx 861xxxx | Билайн | Пермский край |
963-862xxxx 863xxxx 864xxxx 865xxxx 866xxxx 867xxxx 868xxxx 869xxxx | Билайн | Курганская область |
963-87xxxxx 880xxxx 881xxxx 882xxxx 883xxxx 884xxxx | Билайн | Пермский край |
963-885xxxx 886xxxx 887xxxx 888xxxx 889xxxx | Билайн | Кировская область |
963-89xxxxx 90xxxxx | Билайн | Республика Башкортостан |
963-91xxxxx | Билайн | Самарская область |
963-92xxxxx | Билайн | Москва |
963-930xxxx | Билайн | Костромская область |
963-931xxxx 932xxxx 933xxxx 934xxxx 935xxxx 936xxxx 937xxxx 938xxxx 939xxxx | Билайн | Тульская область |
963-940xxxx 941xxxx | Билайн | Приморский край |
963-942xxxx 943xxxx 944xxxx 945xxxx 946xxxx 947xxxx 948xxxx 949xxxx | Билайн | Новосибирская область |
963-950xxxx 951xxxx 952xxxx | Билайн | Красноярский край |
963-953xxxx | Билайн | Тюменская область |
963-954xxxx | Билайн | Республика Хакасия |
963-955xxxx 956xxxx 957xxxx 958xxxx 959xxxx | Билайн | Красноярский край |
963-96xxxxx 97xxxxx | Билайн | Москва |
963-98xxxxx | Билайн | Чеченская Республика |
963-99xxxxx | Билайн | Москва |
Общество — Страница 157 из 532
Кировчан приглашают посмотреть звёзды зимнего неба
Каждые полгода расположение небесных светил меняется из-за того, что зимними ночами нам открывается небо, которое скрывали от нас летние дни. Из-за того, что планета Земля вращается, а звёзды мы видим только ночью, то и взору нашему открываются лишь половина всех созвездий. Половину мы видим летом, половину — зимой. Так, сейчас если выехать
Читать дальшеВакцина от коронавируса: в очереди уже 256 кировчан
Вакцина от коронавируса поступит в Кировскую область в ближайшее время. 7 декабря в Кировской области началась запись на вакцинацию. В первый же день в очередь встали 500 кировчан. Однако по критериям подошли лишь 256 из них. Остальным в прививке было отказано. Об этом сообщил первый зампред областного правительства Дмитрий Курдюмов. По
В Кировской области появился дом Шрека (+ВИДЕО)
Его построил умелец из Советского района Андрей Вдовенко. Дендросад в городе Советске может стать одним из самых посещаемых туристических мест России. А всё благодаря одному человеку. Мастер производственного обучения Суводского лесхоз-техникума Андрей Вдовенко превращает это место в сказочную деревню мультипликационных героев. Несколько лет назад здесь проявилась усадьба хоббитов. Хоббиты — это народ
Читать дальше31 декабря всё-таки может стать выходным днём
Но не в этом году. Законопроект о переносе нерабочего дня с 8 января на 31 декабря рассмотрит Госдума. Инициатором стала партия ЛДПР. Как написал в пояснительной записке глава комитета по труду и социальной политике Госдумы Ярослав Нилов, «учитывая, что в 2022 и 2023 году 31 декабря выпадает на выходные дни, вступление
Читать дальшеВ Кировскую область могут приехать ведущие блогеры страны
Наш регион участвует во всероссийском голосование проекта «ТопБлог». На платформе «Россия — страна возможностей» стартовало голосование за регион, который примет участие в проекте «ТопБлог». Голосование народное общероссийское. Принять участие может каждый. В списке, состоящем из 10 регионов оказалась и Кировская область. Сейчас за неё проголосовало 10%. Мы в пятёрке лидеров. Возглавляет рейтинг
Читать дальшеНа границе Кировской области и Удмуртии появится новый монастырь
Сейчас там начались восстановительные работы. В Удмуртии восстанавливают одну из старинных церквей. Она находится в селе Сада в Ярском районе. Это первый населённый пункт в республике со стороны Кировской области. Он находится практически на границе. В селе есть красивая Вознесенская церковь. Она долгое время находилась в разрушенном состоянии. Но несколько лет назад
Кировчане увидят встречу Юпитера и Сатурна: следующая только через 60 лет
Жители Кировской области увидят редкое явление – соединение Юпитера и Сатурна. До «самого ожидаемого астрономического события года» осталось меньше трёх недель. Уже сейчас планеты находятся недалеко друг от друга – по космическим, конечно же, меркам. Расстояние между ними составляет около 1,5 градусов, что равняется приблизительно трём дискам полной Луны. В период с
Читать дальшеКировский школьник стал участником шоу «Лучше всех»
12-летний Тимофей Рогожников стал участником шоу «Лучше всех» на Первом канале. Программа с участием кировского школьника вышла в эфир 6 декабря. В очередном выпуске шоу Тимофей продемонстрировал трюки с баскетбольными мячами. Как рассказал мальчик, в детстве он увлекался разными танцевальными направлениями, но в итоге выбрал баскетбольный фристайл. Это не просто фокусы,
Читать дальшеКоронавирус может закрыть границы между регионами
Новые меры борьбы с коронавирусной инфекцией могут быть приняты в России. Министр здравоохранения РФ Михаил Мурашко предложил обсудить ограничение передвижения россиян между регионами и внутри них. — Вторая волна показывает, что возникающие очаги внутри страны требуют рассмотрения определенного ограничения передвижения физических лиц, в том числе между субъектами, а также подчас и внутри
Читать дальшеВмёрзший в лёд лебедь Григорий пошёл на поправку
157 студентов региона пишут работы по кейсам профстажировок
Партнеры-работодатели проекта «Профстажировки 2. 0» рассмотрели заявки на участие во второй волне конкурса студенческих работ. Конкурсанты приступили к подготовке курсовых и дипломных работ по их кейсам. Среди них 157 студентов из Саратовской области.
В десятку самых активных учебных заведений по стране по числу участников вошел Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И. Вавилова. Авторы лучших решений получат возможность пройти практику или стажировку.
«Профстажировки 2.0» – совместный проект президентской платформы «Россия – страна возможностей» и Общероссийского народного фронта. Проект реализуется в рамках федерального проекта «Социальные лифты для каждого» национального проекта «Образование».
Всего на платформе проекта размещено 4559 кейсов от 1296 работодателей. По итогам первой волны конкурса победителями стали 505 студентов из 55 регионов России.
«Мы наблюдаем значительный рост интереса к проекту: на сегодняшний день на нашей платформе зарегистрировались 108 642 студента. Партнеры-работодатели уже рассмотрели поступившие заявки на решение кейсов во второй волне конкурса. К подготовке научных работ приступил 5051 студент. Это на 30% выше показателя первой волны, – рассказал генеральный директор АНО «Россия – страна возможностей», сопредседатель Центрального штаба Общероссийского народного фронта Алексей Комиссаров, – думаю, многих участников вдохновили истории победителей, которые уже прошли практики и стажировки по всей стране и могут рассказать о своем опыте».
«За первую волну конкурса мы максимально отработали его механику, чтобы ко второй все конкурсные этапы были еще более понятными для участников. До введения режима самоизоляции многие победители первой волны успели постажироваться на предприятиях и получить ценные навыки и полезную строчку в резюме. Среди них есть и те, кто в этот период прошел оплачиваемую стажировку и даже трудоустроился. Сейчас многие проходят практику в дистанционном формате. Одним из результатов такой совместной работы с предприятиями стали обучающие вебинары и мастер-классы. Мы внимательно следим за успехами наших победителей, помогая им максимально реализоваться в проекте», – рассказал руководитель проекта «Профстажировки 2.0», член Общественной палаты России Илья Семин.
Министерство образования области
+7 923 157 — какой регион, город и оператор (8923157, 923157, +7923157)
Вам звонили с номера, который начинается на +7923157, 8923157 или 923157, и вы хотите узнать откуда звонили, чей код и номер телефона, а так же код какого города это и какой оператор связи обслуживает данный мобильный или стационарный номер телефона?
Оператор связи: | Регионы: |
• Мегафон | Новосибирская область |
☎ Найти номер телефона:
Шаблон телефонных номеров: 923: код 157: префикс ??-??: диапазон номера от 0000 до 9999 | Примеры написания случайных номеров для этого кода и префикса: |
Варианты написания номера телефона для звонков из России: | Примеры написания реальных номеров для этого кода, префикса и подсети (для Звонков из России): |
Как звонить на номера 8923157-??-?? из-за границы? | Примеры случайных номеров для звонокв из-за границы: |
регион | Матери России — Part 157
05.02.2018Около 5 тысяч жителей и гостей Махачкалы сегодня вышли на митинг в поддержку российских спортсменов, не допущенных МОК к участию в Олимпиаде – 2018 в Южной Корее. Поддержать атлетов из России на главной площади Дагестана вышли врио премьер-министра республики Абдусамад Гамидов, спикер Народного Собрания региона Хизри Шихсаидов, врио первого заместителя председателя Правительства РД Анатолий Карибов,…
читать далее 03.02.2018Сегодня в сильнейший мороз и ветер пришло на центральную площадь 5 тыс Чел. Матери России были на переднем фланге и поддерживали Олимпийцев !!!!!
читать далее 31.01.2018На минувшей неделе в клубе «Общение» при Центральной библиотеке прошла очередная встреча. С приветственным словом к собравшимся обратилась председатель регионального отделения движения «Матери России» РД Таиса Магомедова. Было отмечено, что в наступившем году посетителей клуба ждут новые темы и встречи с интересными людьми. Таиса Билаловна проинформировала, что глава города Магомед Абдулаев выписал для пожилых граждан…
Мероприятие под таким названием прошло 26 января, в канун Дня освобождения Ленинграда от блокады, в центральной библиотеке. В нем приняли участие доктор военных наук, профессор кафедры стратегии Военной Академии Генерального штаба Вооруженных Сил России Г. Кириленко, военный комиссар г. Каспийска М. Пашаев, председатель движения «Матери России» Республики Дагестан Таиса Магомедова, директор МБОУ «СОШ №1» Ф.…
читать далееВечер памяти Владимира Высоцкого, посвященный 80-летию поэта и актера, прошел в центральной библиотеке 29 января. В мероприятии приняли участие учащиеся СОШ №1. Открывая встречу, председатель регионального отделения движения «Матери России» РД Таиса Магомедова отметила, что сегодняшняя встреча – это часть цикла бесед, которые предусмотрены в рамках совместной работы по нравственному, эстетическому и патриотическому воспитанию учащихся.…
читать далее 30.01.2018В 2017 году Национальный институт защиты детства реализовал проект «Родительский университет: дистанционное обучение родителей», в котором участвовало 8 субъектов Российской Федерации, в том числе и Оренбургская область. Специалисты института совместно с региональными партнерами разработали и провели дистанционный курс обучения родителей, направленный на формирование у них знаний о возрастных особенностях и потребностях детей, овладение эффективными…
Против барьеров и за мир: 3 февраля пройдет акция «Россия в моем сердце!» Инициатором акции выступает Общественная палата Российской Федерации В первую субботу февраля, ровно за неделю до старта зимней Олимпиады в Пхенчане в поддержку российских спортсменов в Москве и других городах России пройдут патриотические митинги-концерты «Россия в моем сердце!». Инициатором акции выступает Общественная палата Российской Федерации. Главная задача митингов-концертов — выразить поддержку нашим…
читать далее157 курсантов ДВОКУ приняли присягу. Новобранцы приехали в Благовещенск из 38 регионов России.
Новости / 157 курсантов ДВОКУ приняли присягу. Новобранцы приехали в Благовещенск из 38 регионов России. — Амурское областное телевидение
27 апреля 2021, Вторник
Служба новостей
(8 4162 777 201)
Коммерческая служба
(8 4162 771 109)
27 апреля 2021, Вторник
в Благовещенске10°С Главная / Новости / 157 курсантов ДВОКУ приняли присягу. Новобранцы приехали в Благовещенск из 38 регионов России.
157 курсантов ДВОКУ приняли присягу. Новобранцы приехали в Благовещенск из 38 регионов России — Владивостока, Хабаровска, Перьми, Крыма. Торжественное обещание служить на благо Родины первокурсники традиционно дали на плацу военного училища. Репортаж Вероники Федореевой.
05.09.2017 в 14:56
1259
Ещё материалы
Контактная информация
Телефон: +7 (4162) 77-72-01
Электронный адрес: [email protected]
675000, г. Благовещенск
ул. Краснофлотская, 171 (южная трибуна стадиона Амур)
Время работы: с 9:00 — 18:00. Пн-Пт.
_____________________________________
Содержание программ, размещенных на сайте www.amurobl.ru, может не совпадать с содержанием программ, вышедших в эфире «Амурского областного телевидения».
Наши соц. сети
Амурское областное телевидение © 2021
Приволжский полпред Игорь Комаров наградил театр-студию «Браво» из Белебея
Фото: пресс — служба полпреда президента РФ в ПФО
Фото: пресс — служба полпреда президента РФ в ПФОНакануне в Ижевске, в Государственном национальном театре Удмуртской Республики, состоялась торжественная церемония награждения победителей фестиваля «Театральное Приволжье». Награждение победителей среди молодежных и детских коллективов прошло в шести номинациях, были отмечены призеры конкурса афиш.
Третье место в окружном фестивале занял театр-студия «Браво» из Белебея со спектаклем «Алинур». Режиссер постановки Олег Данилин получил диплом победителя из рук полномочного представителя президента России в ПФО Игоря Комарова.
«Приятно, что с каждым годом растет количество участников, особенно среди совсем юных актёров из разных регионов, все больше возникает театральных коллективов на уровне школ и других учебных заведений. Если вы, ребята, станете профессиональными актерами и свяжете жизнь с театром, то, конечно, это будет очень здорово. Если выберете другую профессию, я уверен, участие в фестивале даст вам многое в жизни», – отметил полпред.
В сезоне 2020-2021 гг. участие в фестивале приняли 416 театральных коллективов из всех регионов Приволжского федерального округа: 157 молодежных и 256 школьных театров. Количество актеров, принявших участие в конкурсных постановках, – около 5000 человек.
Полномочный представитель президента наградил молодых актеров в номинациях «Лучший молодежный спектакль» и «Лучший молодежный спектакль о Великой Отечественной войне».
Игорь Комаров также отметил, что фестиваль выйдет на новый этап развития.
«В этом году спектакли победителей в детской и молодёжной номинациях будут показаны на региональном телевидении и на большой сцене. Также мы будем привлекать новых участников, поддерживать новые формы творческой деятельности ребят», — сказал полпред.В ближайшее время дальнейшее развитие проекта будет обсуждаться со всеми главами регионов округа в формате видео-конференц-связи.
Напомним, фестиваль «Театральное Приволжье» – окружной общественный проект, реализация которого началась по инициативе полномочного представителя Президента Российской Федерации в Приволжском федеральном округе Игоря Комарова в год Театра в России (2019 г.).
Конкурс в рамках фестиваля проводится для молодёжных (возраст 18-30 лет) и детских театральных коллективов (возраст 6-17 лет).
Проект направлен на популяризацию молодежного театрального искусства и расширение культурного кругозора молодых людей, поддержку и развитие любительских театральных коллективов.
2 | 0 | Вимер, Джеймс | SR | # 17 Финдли | Суперрегион 3 | 0–0 | 1498.91 | 0,00% / 0,00% | |
12 | 2 | Woods, Коди | SR | # 33 Ашленд | Суперрегион 3 | 0–0 | 1434,19 | ,00% /.00% | |
23 | 4 | Wiechers, Drew | SO | # 33 Ашленд | Суперрегион 3 | 0–0 | 1406,86 | 0,00% / 0,00% | |
28 | 7 | Тенни, Брэндон | SR | # 9 Колледж Лейк-Эри | Суперрегион 3 | 0–0 | 1386,54 | 0,00% / 0,00% | |
31 | 7 | Siemasz, Джон | SR | # 9 Колледж Лейк-Эри | Суперрегион 3 | 0–0 | 1384. 54 | 0,00% / 0,00% | |
35 | 7 | Исбрандт, Алекс | SO | # 17 Финдли | Суперрегион 3 | 0–0 | 1380,83 | 0,00% / 0,00% | |
42 | 6 | Поток, Яков | SO | # 9 Колледж Лейк-Эри | Суперрегион 3 | 0–0 | 1372,83 | ,00% /.00% | |
50 | 7 | Дженкинс, Кэмерон | SR | # 33 Ашленд | Суперрегион 3 | 0–0 | 1365,41 | 0,00% / 0,00% | |
59 | 5 | Томас Поттер | FR | # 9 Колледж Лейк-Эри | Суперрегион 3 | 0–0 | 1352,13 | 0,00% / 0,00% | |
60 | 6 | Langeloh, Хантер | SR | # 8 Университет Тиффина | Суперрегион 3 | 0–0 | 1348. 78 | 0,00% / 0,00% | |
65 | 6 | Лоури, Блейз | JR | # 32 Индианаполис | Суперрегион 3 | 0–0 | 1345,00 | 0,00% / 0,00% | |
69 | 5 | Джонс, Клей | SR | # 32 Индианаполис | Суперрегион 3 | 0–0 | 1341,11 | ,00% /.00% | |
73 | 5 | Карбон, Ник | SO | # 33 Ашленд | Суперрегион 3 | 0–0 | 1337.09 | 0,00% / 0,00% | 2 |
74 | 5 | Monebrake, Уэйд | FR | # 32 Индианаполис | Суперрегион 3 | 0–0 | 1336,89 | ,00% /.00% | |
79 | 2 | Лофасо III, Самуэль | SO | # 8 Университет Тиффина | Суперрегион 3 | 0–0 | 1327,83 | 0,00% / 0,00% | |
81 | 4 | Миллер, Блейк | JR | # 16 West Liberty University | Суперрегион 3 | 0–0 | 1324,78 | ,00% /. 00% | |
83 | 3 | Джекин, Джош | SO | # 33 Ашленд | Суперрегион 3 | 0–0 | 1323,75 | 0,00% / 0,00% | |
86 | 3 | Мур, Чейз | SO | # 17 Финдли | Суперрегион 3 | 0–0 | 1318,80 | 0,00% / 0,00% | |
100 | 17 | Кроуфорд, Джастин | JR | # 24 Нотр-Дам (Огайо) | Суперрегион 3 | 0–0 | 1285.99 | 0,00% / 0,00% | |
105 | 0 | Rivera, Кристиан | SR | # 16 West Liberty University | Суперрегион 3 | 0–0 | 1271,66 | 0,00% / 0,00% | |
110 | 1 | Гриффин, Гаррет | SR | # 32 Индианаполис | Суперрегион 3 | 0–0 | 1248. 32 | 0,00% / 0,00% | |
115 | 8 | Winegardner, Картер | FR | # 16 West Liberty University | Суперрегион 3 | 0–0 | 1245,62 | 0,00% / 0,00% | |
130 | 10 | Pettiford, Дешеа | SO | # 17 Финдли | Суперрегион 3 | 0–0 | 1224.04 | 0,00% / 0,00% | |
131 | 9 | Hemingsen, Хьюстон | JR | # 43 Давенпорт (миль) | Суперрегион 3 | 0–0 | 1218,63 | 0,00% / 0,00% | |
135 | 9 | Crowe, Колби | SO | # 8 Университет Тиффина | Суперрегион 3 | 0–0 | 1208,83 | .00% / 0,00% | |
136 | 8 | Лопес, Квинтин | SR | # 43 Давенпорт (миль) | Суперрегион 3 | 0–0 | 1204,15 | 0,00% / 0,00% | |
140 | 8 | Смит, Иона | FR | # 16 West Liberty University | Суперрегион 3 | 0–0 | 1200,00 | ,00% /. 00% | |
140 | 8 | Даррин, Крис | FR | # 63 Иезуитский университет Уилинга | Суперрегион 3 | 0–0 | 1200,00 | 0,00% / 0,00% | |
140 | 8 | Lasure, Скайлер | FR | # 24 Нотр-Дам (Огайо) | Суперрегион 3 | 0–0 | 1200,00 | ,00% /.00% | |
140 | 8 | Martinez, Альфонсо | FR | # 24 Нотр-Дам (Огайо) | Суперрегион 3 | 0–0 | 1200,00 | 0,00% / 0,00% | |
140 | 8 | Haynes, Чад | FR | # 9 Колледж Лейк-Эри | Суперрегион 3 | 0–0 | 1200,00 | 0,00% / 0,00% | |
140 | 0 | Rivera, Кристиан | FR | # 16 West Liberty University | Суперрегион 3 | 0–0 | 1200. 00 | 0,00% / 0,00% | |
140 | 16 | Парсонс, Кейси | JR | # 64 Университет долины Огайо | Суперрегион 3 | 0–0 | 1200,00 | 0,00% / 0,00% | |
140 | 8 | Дженсен, Брайсон | SO | # 52 Государственный колледж Гленвилля | Суперрегион 3 | 0–0 | 1200.00 | 0,00% / 0,00% | |
140 | 8 | Кент, Эйден | FR | # 64 Университет долины Огайо | Суперрегион 3 | 0–0 | 1200,00 | 0,00% / 0,00% | |
140 | 8 | Welker, Canon | FR | # 16 West Liberty University | Суперрегион 3 | 0–0 | 1200.00 | 0,00% / 0,00% | |
217 | 18 | Такер, Дэвид | FR | # 32 Индианаполис | Суперрегион 3 | 0–0 | 1195,56 | 0,00% / 0,00% | |
228 | 15 | Jacocks, Доминик | SO | # 24 Нотр-Дам (Огайо) | Суперрегион 3 | 0–0 | 1181,11 | . 00% / 0,00% | |
239 | 16 | Пакетт, Джейкоб | FR | # 52 Государственный колледж Гленвилля | Суперрегион 3 | 0–0 | 1169,63 | 0,00% / 0,00% | |
243 | 49 | Starkey, Брайден | SO | # 64 Университет долины Огайо | Суперрегион 3 | 0–0 | 1149,50 | .00% / 0,00% | |
244 | 16 | Лоури, Брок | SO | # 33 Ашленд | Суперрегион 3 | 0–0 | 1149.15 | 0,00% / 0,00% |
Другая перепись: подсчет деревьев в районе Чикаго. Вот почему это важно | Chicago News
Идет перепись деревьев в регионе Чикаго, в последний раз подсчитанная в 2010 году — 157 миллионов. (Брайан Кроуфорд / Flickr)
сотрудников переписи населения разъезжали по всему Чикагскому региону, иногда путешествуя на каноэ, собирая жизненно важную демографическую и географическую информацию и записывая такие статистические данные, как диаметр на высоте груди (DBH). Потому что предметы, о которых идет речь, — деревья.
Предполагается, что в течение октября проводится перепись деревьев в Чикаго 2020 года, которую проводит Davey Resource Group под руководством Morton Arboretum.
Во многих отношениях опрос служит тем же целям, что и подсчет населения США раз в десять лет, проводимый федеральным правительством.
Результаты предоставят моментальный снимок кроны деревьев в регионе, с записью для потомков их количества и типов, а также их местоположения, возраста, роста и состояния здоровья.И, как эхо переписи населения, собранные данные будут использоваться для направления ресурсов и руководства государственной политикой.
ИнвентаризацияЧикаго является крупнейшим предприятием такого рода в стране, примечательным как своей широтой (охватывающей территорию из семи округов), так и тем, что он пересматривает те же 1400 участков, которые были учтены во время первой переписи деревьев в 2010 году, говорится в сообщении. Николь Кавендер, вице-президент по науке и охране природы Дендрария Мортона.
Случайно выбранные участки, примерно 200 из которых находятся в черте города Чикаго, расположены на государственных, частных, жилых и коммерческих землях.Спутниковые снимки и другая информация дополняют картину.
«Вероятно, мы знаем о наших деревьях больше, чем любой другой город в США», — сказал Кавендер. «Перепись 2010 года, безусловно, помогла нам определить наши приоритеты, а перепись 2020 года поможет нам понять изменения».
По данным Лесной службы США, деревья в регионе Чикаго приносят прибыль в размере 51,2 миллиарда долларов. (Пэтти Ветли / Новости WTTW)
Для тех, кто сказал бы: «Это просто деревья, которым все равно», подумайте:
Добавление данных переписи 2010 года в программу под названием iTree, the U.По оценке S. Forest Service, 157 миллионов деревьев региона накапливают 16,9 миллиона тонн углерода, поглощают 2,5 миллиона тонн углекислого газа, удаляют 18 000 тонн загрязняющих веществ из воздуха и ежегодно экономят 44 миллиона долларов на расходах на электроэнергию для жилищного строительства. По данным Лесной службы, совокупная стоимость этих пособий составляет 51,2 миллиарда долларов.
«Эти инвентаризации помогают нам понять, какие экосистемные услуги предоставляются городским лесом», — сказал Кавендер.
Но перепись 2010 года ясно показала, что эти блага не распределяются поровну между жителями региона из-за значительного дисбаланса в распределении деревьев.
Например,Highland Park может похвастаться 49% покрытием навеса и 21% непроницаемой поверхностью (здания, бетон, асфальт и т. Д.) По сравнению с некоторыми общинами в Чикаго, где навес менее 10% и более 70% непроницаемая поверхность. Меньшее покрытие навеса означает меньшую тень — что может означать повышение температуры на 10 градусов — и более низкое качество воздуха.
«Качество воздуха так сильно влияет на здоровье человека, и мы видим все больше и больше этих корреляций в здоровье человека и качестве воздуха, а затем и в кроне деревьев. Это часть нашей дискуссии по вопросам справедливости, чтобы обеспечить всем общинам доступ к здоровому пологу леса », — сказал Кавендер. «У нас определенно огромные различия по всему Чикагскому региону, и нам действительно нужно обращать на это внимание».
Инвазивная облепиха чрезмерно распространена в кронах деревьев Чикаго. Если по переписи 2020 года будет зафиксировано снижение, это будет положительным знаком.(Лоррейн ДиСабато / Flickr)
В ответ на результаты 2010 года Дендрарий Мортона и десяток других организаций, включая Openlands, Nature Conservancy, Чикагский парковый район, лесные заповедники округа Кук и Лесную службу США, в 2015 году создали Чикагскую региональную инициативу по деревьям (CRTI). Миссия группы состоит в том, чтобы решить многие из проблем, выявленных в ходе переписи 2010 года, и составить план по созданию более здорового и разнообразного регионального покрова к 2050 году.
Перепись 2020 года покажет, двигалась ли стрелка в правильном направлении за последнее десятилетие.
Одна из главных проблем группы заключается в том, что деревья в Чикаго стареют и не воспроизводятся с очень высокой скоростью, сказал Кавендер. В частности, дубы изо всех сил пытаются восстановиться, и одно объяснение этому так же просто, как желуди, падающие на тротуары и парковки вместо земли.
«Там много непроницаемых поверхностей», — сказал Кавендер. «Будет интересно посмотреть, будет ли у нас в 2020 году больше, чем было раньше».
Еще одним тревожным открытием, по ее словам, стала распространенность облепихи среди полога региона, составляющего почти 30% от общего числа 157 миллионов.Инвазивный кустарник может быть зеленым, но он вытесняет другую растительность, вызывает эрозию и мало служит пищей или средой обитания для диких животных.
«Благодаря этим данным люди понимают, что нам действительно нужно начать замену облепихи», — сказал Кавендер.
Агентства, включая Парк округа Чикаго и Лесной заповедник округа Кук, реализуют ряд проектов по восстановлению с этой целью. Была также создана программа «Здоровые живые изгороди», чтобы предоставить домовладельцам и ландшафтным дизайнерам лучшие альтернативы облепихе.
Если перепись 2020 года покажет падение крушины, этот дефицит будет положительным результатом, но другие потери будет труднее проглотить, сказал Кавендер.
Она полностью ожидает, что показатели Чикаго в 2020 году будут ниже, чем в 2010 году, хотя бы по той причине, что разрушительный эффект изумрудного мотылька из ясеня.
Десять лет назад бурильщик только начинал опустошать национальные ясени. С тех пор считается, что этот жук уничтожил более 12 миллионов ясеней в районе Чикаго.
«Мы надеемся, что это не больше наших оценок», — сказал Кавендер.
Пень ясеня, несущий явные признаки разрушительного Изумрудного Пепельника. (Пэтти Ветли / Новости WTTW)
После того, как будут получены результаты переписи населения 2020 года, организации-члены CRTI поделятся данными не только между собой, но и с муниципалитетами региона.
«Мы создаем пакеты для сообщества, которые позволяют каждому муниципалитету видеть свою часть городского леса, и разрабатываем план, который работает для них», — сказал Кавендер.
Одно сообщество может решить увеличить тень в своем деловом районе, другое может решить посадить деревья вдоль транспортных коридоров, чтобы улучшить качество воздуха. По словам Кавендера, цель состоит в том, чтобы заставить людей задуматься о деревьях как части процесса планирования и развития.
«Мы надеемся, что все больше и больше людей будут осознавать преимущества, которые приносят деревья, и необходимое планирование. Мы, как люди, должны взять на себя ведущую роль в обеспечении того, чтобы у нас действительно были эти здоровые леса, эти здоровые деревья на будущее », — сказала она.«Мы также стараемся, чтобы люди понимали, что это часть нашей инфраструктуры, это зеленая инфраструктура, но она по-прежнему является частью нашей инфраструктуры, такой как дороги и канализация. И на самом деле это может быть единственная инфраструктура, стоимость которой со временем растет ».
Свяжитесь с Пэтти Ветли: @pattywetli | (773) 509-5623 | [адрес электронной почты защищен]
Ответы на опрос из Региона 5: Достигаем ли мы общественные цели в отношении лесов и пастбищ?
Лесная служба США
Уход за землей и служение людям
Министерство сельского хозяйства США
Ответы на опрос из Региона 5: Достигаем ли мы общественные цели в отношении лесов и пастбищ?
Автор (ы): Донна Л. Lybecker; Дебора Дж. Шилдс
Дата: 2005
Источник: Gen. Tech. Реп. РМРС-ГТР-157. Форт Коллинз, Колорадо: Министерство сельского хозяйства США, Лесная служба, Исследовательская станция Скалистых гор. 32 п.
Серия публикаций: Общий технический отчет (GTR)
Станция: Исследовательская станция Скалистых гор
PDF: Скачать публикацию (2 МБ)
Описание В рамках исследования ценностей, целей, убеждений и взглядов, реализованного в рамках Национального исследования по вопросам отдыха и окружающей среды, более 7000 респондентов по всей стране были опрошены об их ценностях в отношении государственных земель. цели управления этими землями, представления о роли, которую Лесная служба Министерства сельского хозяйства США должна играть в достижении этих целей, и отношение к работе, которую выполняет агентство.Этот отчет — один из серии аналогичных региональных отчетов — показывает, что респонденты с юго-запада Тихого океана (регион лесной службы Министерства сельского хозяйства США 5: Калифорния и Гавайи) очень похожи на респондентов из остальных Соединенных Штатов, хотя респонденты с юго-запада Тихого океана показывают более сильная тенденция к разрешению доступа для различных целей и немного менее склонна к информированию общественности. В масштабах всей страны, как и на юго-западе Тихого океана, наиболее важной задачей было сохранение и защита лесов и пастбищных бассейнов. Примечания к публикации- Вы можете отправить электронное письмо по адресу [email protected], чтобы запросить печатную копию этой публикации.
- (Укажите точно, , какую публикацию вы запрашиваете, и свой почтовый адрес.)
- Мы рекомендуем вам также распечатать эту страницу и приложить ее к распечатке статьи, чтобы сохранить полную информацию о цитировании.
- Эта статья была написана и подготовлена государственными служащими США в официальное время и поэтому находится в открытом доступе.
XML: Просмотр XML
Показать больше
Показать меньше
https: // www.fs.usda.gov/treesearch/pubs/20742
Гидрогеохимическое исследование шести геотермальных участков в Гондурасе, Центральная Америка (Технический отчет)
Goff, FE, Truesdell, AH, Grigsby, CO, Janik, CJ, Shevenell, LA, Paredes, JR, Gutierrez, JW, Trujillo, Jr, and Counce, D. A. Гидрогеохимическое исследование шести геотермальных участков в Гондурасе, Центральная Америка . США: Н. П., 1987.
Интернет. DOI: 10.2172/6268112.
Goff, FE, Truesdell, AH, Grigsby, CO, Janik, CJ, Shevenell, LA, Paredes, JR, Gutierrez, JW, Trujillo, Jr, & Counce, D. A. Гидрогеохимическое исследование шести геотермальных участков в Гондурасе, Центральная Америка . Соединенные Штаты. https://doi.org/10.2172/6268112
Гофф, Ф. Э., Трусделл, А. Х, Григсби, К. О., Яник, С. Дж., Шевенелл, Л. А., Паредес, Дж. Р., Гутьеррес, Д. В., Трухильо, младший, и Каунс, Д. А.Пн.
«Гидрогеохимическое исследование шести геотермальных участков в Гондурасе, Центральная Америка». Соединенные Штаты. https://doi.org/10.2172/6268112. https://www.osti.gov/servlets/purl/6268112.
@article {osti_6268112,
title = {Гидрогеохимическое исследование шести геотермальных участков в Гондурасе, Центральная Америка},
author = {Гофф, Ф. Э. и Трусделл, А. Х. и Григсби, К. О. и Яник, К. Дж. и Шевенелл, Л. А. и Паредес, Д. Р. и Гутьеррес, Д. В. и Трухильо, мл. и Каунс, Д. А.},
abstractNote = {Мы провели подробные гидрогеохимические исследования на шести геотермальных участках в западном Гондурасе: Азакуальпа, Эль-Оливар, Павана, Платанарес, Самбо-Крик и Сан-Игнасио.Ни одно из этих мест не связано с четвертичным кислым вулканизмом, хотя Эль-Оливар находится рядом с небольшим четвертичным базальтовым полем, а Павана является частью пояса активности горячих источников, параллельного и в 35 км к востоку от вулканической дуги Центральной Америки. Ни на одном из участков нет кислотно-сульфатных вод, указывающих на преобладание паров. Тепловые жидкости характеризуются pH от 7 до 10, Cl <125 мг / л, HCO / sub 3 /> Cl, SO / sub 4 / больше или равно Cl, B меньше или равно 17 мг / л, меньше или равно to4 мг / л, и As меньше или равно1.25 мг / л. Анализ стабильных изотопов воды показывает, что подпитка геотермальных систем обычно происходит из высокогорных районов, прилегающих к участкам. Содержание трития в явно неразбавленных тепловых жидкостях колеблется от 0 до 0,4 T. U., что указывает на время пребывания жидкостей в системах более 500 лет. Различные геохимические индикаторы показывают, что смешивание горячих и холодных конечных флюидов происходит в системе на Платанаресе и, в меньшей степени, в системах на Сан-Игнасио и Азакуальпа.Не наблюдается перемешивания флюидов, выходящих из Павана, Самбо-Крик или Эль-Оливар. Кипение - это доминирующий процесс, ответственный за тонкие геохимические изменения в Азакуальпе и, возможно, Сан-Игнасио. Наши наилучшие оценки подземных пластовых температур: 225 / sup 0 / C в Платанаресе, 190 / sup 0 / C в Сан-Игнасио, 185 / sup 0 / C в Azacualpa, 155 / sup 0 / C в Sambo Creek, 150 / sup 0 / C в Паване и 120 / sup 0 / C в Эль-Оливар. Расчетная выходная мощность трех самых горячих участков составляет 45 тепловых мегаватт в Платанаресе, 14 тепловых мегаватт в Сан-Игнасио и 13 тепловых мегаватт в Азакуальпе.},
doi = {10.2172 / 6268112},
url = {https://www.osti.gov/biblio/6268112},
journal = {},
number =,
объем =,
place = {United States},
год = {1987},
месяц = {6}
}
Эволюция области S-локуса у родственников Arabidopsis
- © 2011 Американское общество биологов растений. Все права защищены.
Abstract
Локус S , единственный полиморфный локус, отвечает за самонесовместимость (SI) в семействе Brassicaceae и многих родственных семействах растений. Несмотря на его важность, наши знания об эволюции локуса S в значительной степени ограничены причинными генами, кодирующими рецептор киназы рецептора локуса S (SRK) и лигандом белка, богатого цистеином (SCR), локуса S SI система. Здесь мы представляем высококачественные последовательности геномной области шести гаплотипов локуса S : Arabidopsis ( Arabidopsis thaliana ; один гаплотип), Arabidopsis lyrata (четыре гаплотипа) и Capsella rubella (один гаплотип). .Мы сравнили их с эталонными гаплотипами локуса S самосовместимого Arabidopsis и его SI-конгенера A. lyrata . Впоследствии мы реконструировали вероятную геномную организацию локуса S у последнего общего предка Arabidopsis и Capsella . Как сообщалось ранее, два гена, определяющих SI, SCR и SRK , показали образец коэволюции. Вдобавок, в соответствии с предыдущими исследованиями, мы обнаружили, что дупликация, генная конверсия и положительный отбор были важными факторами в эволюции этих двух генов и, по-видимому, вносили свой вклад в создание новых специфичностей распознавания.Интересно, что неактивный гаплотип локуса S у самосовместимых видов C. rubella , вероятно, является старым гаплотипом локуса S , который только совсем недавно стал фиксированным, когда C. rubella отделился от его предок SI, Capsella grandiflora .
Самонесовместимость (SI) — важный механизм, используемый многими видами покрытосеменных для предотвращения самооплодотворения (самоопыления), который можно рассматривать как эволюционный тупик, поскольку он ограничивает адаптивный потенциал и вызывает инбридинговую депрессию выражением рецессивного вредного воздействия. мутации (Lynch et al. , 1995; Чарльзуорт и др., 2005; Newbigin, Uyenoyama, 2005; Busch and Schoen, 2008). SI часто контролируется одним полиморфным локусом, локусом S . У Brassicaceae локус S содержит два детерминантных гена специфичности: S-LOCUS RECEPTOR KINASE ( SRK ), который кодирует стигматическую рецепторную киназу; и SP11 / S-LOCUS CYSTEINE-RICH PROTEIN ( SCR ) (далее SCR ), который кодирует небольшой богатый Cys белок, локализованный в пыльцевой оболочке, который является лигандом для рецептора SRK (Nasrallah , 2002).Ингибирование пыльцы происходит, когда одна и та же специфичность локуса S выражается как пыльцой, так и пестиком (Nasrallah, 2002). Локус S является исключительным, с его многочисленными трансвидовыми полиморфизмами (Charlesworth, 2006), обеспечивая парадигму частотно-зависимого отбора (Schierup and Vekemans, 2008; Leducq et al., 2011).
Трансформация Arabidopsis ( Arabidopsis thaliana ) гаплотипами локуса S из самонесовместимого Arabidopsis lyrata может восстанавливать SI в некоторых образцах (Nasrallah et al. , 2002). Следовательно, вероятно, что начальная инактивация локуса S была ключевым шагом в переходе от SI к самосовместимости (SC) у этого вида. Арабидопсис является модельным растением среди видов SC. Система SI неактивна в самоопыляющемся эталонном штамме Arabidopsis Columbia (Col-0), и как SRK , так и SCR становятся псевдогенизированными (Kusaba et al., 2001). Инактивация локуса S коррелирует с переходом от ауткроссинга к самоопылению как у Arabidopsis, так и у арабидопсиса, родственника Capsella rubella (Tang et al., 2007; Guo et al., 2009; Tsuchimatsu et al., 2010). Переходы в СК часты у растений. Этот переход происходил независимо много раз в нескольких линиях (Barrett, 2002, 2010). У Brassicaceae большинство триб включает самоопыляющиеся виды (Fobis-Loisy et al., 2004).
Молекулярный механизм действия и функциональные полиморфизмы в локусе S и в системе SI были подробно описаны для Arabidopsis и родственных родов (Uyenoyama, 2000; Schierup et al. , 2001, 2006; Kachroo et al., 2002; Сато и др., 2002; Takebayashi et al., 2003; Насраллах и др., 2004; Пригода и др., 2005; Bechsgaard et al., 2006; Paetsch et al., 2006; Лю и др., 2007; Мейбл и Адам, 2007; Шерман-Бройлс и др., 2007; Тан и др., 2007; Busch et al., 2008; Shimizu et al., 2008; Guo et al., 2009; Castric et al., 2010; Tsuchimatsu et al., 2010).
Из-за трудностей с восстановлением чрезвычайно разнообразных последовательностей в этом локусе с помощью ПЦР большинство анализов локуса S было сосредоточено на SCR и SRK , а иногда только на частичном S-домене SRK ген.Другие гены в области локуса S редко исследовались всесторонне (Kamau and Charlesworth, 2005; Hagenblad et al., 2006; Kamau et al., 2007; Ruggiero et al., 2008). Однако существует сильное подавление рекомбинации и сцепленных локусов, что может влиять на эволюцию систем SI (Uyenoyama, 2005). Недавно было продемонстрировано, что псевдо-SC может быть вызван локус-связанным геном S , который может регулировать уровни транскрипта SRK (Liu et al. , 2007). Подробные сведения о последовательностях локуса S от дополнительных родственников Arabidopsis также необходимы, чтобы определить, отражают ли полиморфизмы локуса S у самоопыляющихся видов, таких как Arabidopsis и C. несовместимого предка или они были продуцированы дифференциальной деградацией локуса S в разных самофертильных популяциях (Sherman-Broyles et al., 2007). Возраст S -локусных аллельных линий у родственников Arabidopsis до сих пор окончательно не определен.Некоторые аллельные линии в локусе S в A. lyrata очень старые (Schierup et al., 2001; Paetsch et al., 2006; Edh et al., 2009): вероятно, они предшествуют расхождению между линии аллелей класса I и класса II в Brassica , по оценкам, произошли 40 миллионов лет назад (Uyenoyama, 1995). Наконец, более широкие знания о разнообразии последовательностей локуса S необходимы для понимания того, как новые специфичности развиваются в двухгенной системе, которая зависит от совпадения специфичности между двумя генами.
Чтобы ответить на эти вопросы, необходимо учитывать два фактора. Во-первых, важно сравнить гаплотипы локуса S между родственными видами SI и SC. Во-вторых, должны быть проанализированы как ключевые гены, так и связанные гены в локусе S . Поэтому мы секвенировали бактериальные искусственные хромосомные клоны (ВАС), покрывающие область локуса S , включая центральную область от At4g21350 ( PLANT U-BOX8 [ PUB8 ]) до At4g21380 ( ARK3 ) и несколько генов. с обеих сторон у двух образцов самоопыляющегося вида Arabidopsis (Ath-Cvi) и C.краснуха (Cru) и из четырех хромосом ауткроссинговых видов A. lyrata (Aly-S16, Aly-S38, Aly-S50 и Aly-Sb). По одному дополнительному гаплотипу локуса S , каждый из которых уже был секвенирован, и поэтому он был доступен в проектах по секвенированию эталонного генома у Arabidopsis (Ath-Col; Arabidopsis Genome Initiative, 2000) и A. lyrata (Aly-Sa, из эталонного штамма MN47). ; Hu et al., 2011). Наше сравнение восьми гаплотипов локуса S дает новое понимание эволюции локуса S у Brassicaceae.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Геномная организация и содержание генов локуса
SДля масштабирования филогенетической выборки мы рассмотрели географическую ( A. lyrata из Европы и Северной Америки) и систему спаривания (виды SC Arabidopsis и C. краснуха , SI видов A. lyrata ) разнообразие. Когда мы начали эту работу несколько лет назад, была доступна только одна библиотека BAC C. rubella ; таким образом, был секвенирован только один гаплотип C. rubella .Были секвенированы шесть ВАС, покрывающих центральную область локуса S , от At4g21350 ( PUB8 ) до At4g21380 ( ARK3 ): Arabidopsis (один гаплотип локуса S ), A. lyrata (четыре S -локус гаплотипа) и C. rubella (один S -локальный гаплотип). Для SRK и SCR опубликованные SRKa / SCRa или SRKb / SCRb (Kusaba et al., 2001) являются тем же гаплотипом локуса S , что и Aly-Sa или Aly-Sb, соответственно.Только для Aly-Sb мы не смогли полностью заполнить все монтажные зазоры. Тем не менее, четыре больших контига Aly-Sb содержали как SCR , так и SRK в дополнение к другим фланкирующим генам локуса S . Все шесть секвенированных гаплотипов локуса S разделяют область от At4g21326 до At4g21430, за исключением Aly-S50, где последовательность от экзона 1 до части экзона 6 At4g21326 отсутствует (рис. 1C). Филогенетическое дерево (дополнительный рис. S1) показало, что восстановленные гаплотипы локуса S охватывают несколько линий локализации S через Arabidopsis и родственников Capsella .
Рисунок 1.Сравнение гаплотипов локусов S . A — точечный график, показывающий сходство и перестройку последовательностей между каждым гаплотипом локуса S и Ath-Col. B, график VISTA, показывающий сходство между Ath-Col и другими гаплотипами локуса S . C. Сравнение содержания генов среди различных гаплотипов локуса S . Красные стрелки указывают усеченные последовательности, относящиеся к SRK-, SCR- и ARK3. Красные символы N представляют собой промежутки, а черные символы N представляют собой большие фрагменты, не отрисованные в масштабе (фактическая длина в килобайтах указана ниже).[Цветную версию этого рисунка см. В статье в Интернете.]
Сравнение шести секвенированных гаплотипов локуса S и эталонного генома локуса Arabidopsis и A. lyrata S -локус гаплотипов, длина восьми S гаплотипы -локуса (от At4g21326 до At4g21430) варьируются от 56,1 т.п.н. (Ath-Cvi) до 116,5 т.п.н. (Aly-Sb; дополнительная таблица S1). Последовательности по обе стороны от области локуса core S высококонсервативны и синтеничны, в то время как область ядра сильно различается (рис.1, А и Б). Порядок и ориентация генов сохраняются (рис. 1, B и C), за исключением Aly-Sa, инверсия которого включает SCR и SRK (рис. 1), а также Aly-S50 и Aly-Sb. , которые имеют инверсию гена SCR (рис. 1C). Вероятно, что в большинстве гаплотипов локуса S имеется один ген SCR и один ген SRK в ориентации голова к голове.
11 кодирующих белок генов, обнаруженных в ссылке на арабидопсис S -локус гаплотипа Ath-Col, консервативны во всех -S -локусных гаплотипах.Однако Aly-S16, Aly-S50, Aly-Sa и Aly-Sb имеют один или два дополнительных гена, которые не являются общими ни с одним из других гаплотипов локуса S (рис. 1C; дополнительная таблица S1). . Кроме того, есть несколько частично дублированных генов, включая SCR -подобные последовательности ( SCR2 и SCR3 ) и SRK -подобный ген (At4g21366) в Ath-Col, SCR3 -подобный фрагмент в Ath-Cvi и ARK3 -подобный фрагмент в Aly-S38.
Содержание мобильных элементов в разных гаплотипах S -локуса сильно различается, от 5.45% в Ath-Cvi до 31,27% в Aly-Sb (дополнительные таблицы S2 и S3). Гаплотипы локуса Arabidopsis S имеют наименьшее количество мобильных элементов, в то время как Cru занимает промежуточное положение. Количество и время вставки ретротранспозонов с длинными концевыми повторами (LTR) также различаются (дополнительная таблица S2).
Трансспецифическое совместное использование аллелей и коэволюция
В Ath-Col, Aly-S38, Aly-S50 и Cru (рис. 2; таблица I) SCR представлен усеченной открытой рамкой считывания (ORF), как предполагается из выведенных аминокислотных последовательностей.В Ath-Col, Ath-Cvi и Cru гены SRK также имеют укороченные ORF (Kusaba et al., 2001; Tang et al., 2007; Shimizu et al., 2008; Guo et al., 2009). . Аминокислотные последовательности гена SCR сильно различаются, но восемь консервативных остатков Cys (Kusaba et al., 2001) были обнаружены в каждом гаплотипе локуса S с полной ORF (рис. 2).
Рисунок 2.Выравнивание последовательностей, связанных с SCR и .
Таблица I. Направление SCR, длина интрона и расстояние от SRK-1 указывает на то, что был обнаружен только первый экзон или его часть.NA указывает, что расстояние от SCR до SRK не может быть оценено для промежутков в пределах Aly-Sb.
Топологии филогенетических деревьев для SCR и SRK совпадают. Ath-Cvi и Aly-S16, а также Aly-S38 и Cru показывают близкие отношения, поддерживая паттерн коэволюции для SCR и SRK (Рис. 3; Дополнительные Рис. S1 и S2). Ни один из других генов в локусе S не показал такой же трансвидовой модели (дополнительный рис.S3), даже не At4g21380 ( ARK3 ), который находится менее чем на 3 т.п.н. от гена SRK в большинстве гаплотипов локуса S . Таким образом, неравновесие по сцеплению очевидно слабое и ограничено узкой областью, от SCR до SRK .
Рисунок 3.Соответствующие филогенетические деревья последовательностей SCR и SRK .
Длина одиночного интрона в SCR может сильно отличаться, даже между близкородственными S -локусными гаплотипами, такими как Ath-Cvi (2036 п.н.) и Aly-S16 (1044 п.н.; Таблица I).Длина межгенной области между SRK и SCR для SCR только с первым экзоном, которая была рассчитана на основе расстояния от конца первого экзона SCR до SRK , также составляет высокая вариабельность: от 227 п.н. в Ath-Cvi до 14 422 п.н. в Cru (таблица I).
Конверсия гена
Часто встречаются дупликации в основной области локуса S , включая дупликации SCR , SRK и ARK3 . SRK и ARK3 тесно связаны по последовательности, и было обнаружено пять потенциальных событий генной конверсии с размером преобразованного фрагмента от 31 до 391 п.н. (Таблица II). Преобразование гена также, по-видимому, произошло между SRK и ARK3 как в Aly-Sb, так и в Ath-Col, а также между SRK -подобным (At4g21366) и SRK и между SRK -подобным (At4g21366). и ARK3 в Ath-Col. Затронуты были экзон 7 из SRK и ARK3 , за исключением события конверсии гена между At4g21366 и ARK3 в Ath-Col, которое включало экзоны 6 и 7.
Таблица II. Конверсии генов в последовательностях, связанных с SRK и ARK3Доказательства положительного отбора
Мы проверили, повлиял ли положительный отбор на эволюционную дивергенцию локуса S . Поскольку псевдогены смешивают такие тесты и демонстрируют различные модели эволюции, чем функциональные гены, мы исключили их из нашего анализа. Соотношение несинонимичных и синонимичных мутаций (d N / d S ), усредненное по всем сайтам и клонам, варьировалось от 0.11 (At4g21350) до 1,21 ( SCR ; Таблица III). Для трех генов, SCR , SRK и ARK3 , модель положительного отбора соответствовала данным значительно лучше, чем нейтральная модель (Таблица III), хотя ген SCR имел гораздо более высокую долю кодонов с положительным результатом. выбор чем SRK и ARK3 (рис.4).
Таблица III. Доказательством адаптивной эволюции генов, расположенных в области S-локусаM0, является соотношение d N / d S , усредненное по всем сайтам и линиям.M7 по сравнению с M8 указывает результат теста правдоподобия. −1 означает, что значение 2Δℓ (двойная логарифмическая разница правдоподобия между двумя моделями) равно 0 или меньше 0,0001, и между двумя моделями нет значительной разницы. Оценки параметров показывают долю аминокислот, которые, по прогнозам, находятся в процессе адаптивной эволюции (и их соответствующее соотношение d N / d S ) из модели M8. NA означает неприменимо, поскольку нет существенной разницы между моделью положительного отбора и нейтральной моделью.Положительно выбранные сайты представляют собой аминокислоты при положительном отборе с байесовским задним P > 0,95 на основе модели M8 с использованием байесовского эмпирического байесовского метода. Ns — количество последовательностей в анализе. LA указывает кодон в выравнивании. Для гена SRK Aly-S16 является эталонной последовательностью, а для гена SCR эталонной последовательностью является Ath-Cvi. Для ARK3, и других генов Ath-Col является эталоном. * P <0,05, ** P <0.001, *** P <0,0001.
Рисунок 4.Положительный отбор и вариация d N / d S среди кодонов. А, SRK . B, SCR . С, ARK3 . Одиночные звездочки представляют кодоны с байесовской апостериорной вероятностью положительного отбора более 75%, а двойные звездочки представляют кодоны с байесовской апостериорной вероятностью положительного отбора более 95%.
ОБСУЖДЕНИЕ
Геномная организация и содержание гена локуса
S в линии Arabidopsis / CapsellaХотя центральная область локуса S между геном PUB8 и ARK3 очень подвижна. Многие независимые вставки, дупликации и инверсии, гены, фланкирующие самые удаленные гены PUB8 и ARK3 , оказались консервативными в отношении ориентации и порядка генов в восьми проанализированных гаплотипах локуса S .Однако более распространенная ориентация «голова к голове» у SCR и SRK , однако, изменена в Aly-S50, Aly-Sb и Ath-C24 (рис. 5). Aly-Sa имеет инверсию, включающую область SCR — SRK , но относительная ориентация аналогична другим гаплотипам локуса S . Мы пришли к выводу, что предковая организация локуса S в линии Arabidopsis / Capsella , по-видимому, представляет собой один ген SCR и один ген SRK в ориентации голова к голове, фланкируемые генами PUB8 и . Гены ARK3 транскрибируются из той же цепи, что и SRK (рис.5). Дополнительные гены, которые не являются общими ни с одним из других гаплотипов локуса S , должны происходить независимо от конкретных линий.
Рисунок 5.Предлагаемая история локуса S . Время расхождения (миллион лет назад [MYA]) справа рассчитано на основе синонимичных замен среди ортологов гена ADH, извлеченных из эталонных геномов (Col-0 и MN47) и GenBank (AF110435; C. rubella ) с использованием частота спонтанных мутаций, оцененная у Arabidopsis (Ossowski et al., 2010). Время расхождения между A. lyrata и Arabidopsis согласуется с недавним исследованием с использованием свидетельств окаменелостей (Beilstein et al., 2010). Серые стрелки указывают на усеченные ORF. Буквы от A до F представляют встроенные гены (относительно Ath-Col): A, AT4G04400-подобные; B, подобное AT5G32590; C, подобный AT4G07320; D, подобный AT3G42410; E, подобное AT3G13270; F, типа AT2G07760.
Трансвидовой полиморфизм и коэволюция
Трансвидовой полиморфизм типичен для систем SI растений (Sato et al., 2002; Bechsgaard et al., 2006; Paetsch et al., 2006), систему SI грибов (May et al., 1999) и систему главного комплекса гистосовместимости позвоночных животных (Adams et al., 2000). В роду Brassica возраст некоторых гаплотипов S -локуса оценивается примерно от 20 до 40 миллионов лет (Uyenoyama, 1995). У Solanaceae возраст S-РНКазы, которая является детерминантой женской специфичности SI в этом семействе, оценивается примерно в 70 миллионов лет (Xue et al., 1996).Некоторые аллельные клоны основной системы комплекса гистосовместимости животных, по-видимому, существовали по крайней мере 20 миллионов лет (Klein et al., 1998). Поскольку гены локуса S , по-видимому, находятся в процессе отбора, невозможно легко определить возраст гаплотипа локуса S с помощью молекулярных часов. Тесное родство гаплотипов Ath-Cvi и Aly-S16 между Arabidopsis и A. lyrata , а также гаплотипов Aly-S38 и Cru между A. lyrata и C.краснуха (Paetsch et al., 2006) предполагает, что этим гаплотипам S -локуса не менее 13 и 22 миллионов лет соответственно (рис. 5).
Ожидается, что у Brassicaceae события рекомбинации, нарушающие сцепление совпадающих аллелей SRK и SCR , приведут к нарушению SI. Паттерн коэволюции между SRK и SCR предполагает, что они находятся в сильном неравновесном сцеплении, что согласуется с предыдущим исследованием популяционной генетики в A.lyrata (Камау и др., 2007). В Brassica топология дерева SRK и SCR в основном похожа (Sato et al., 2002; Edh et al., 2009). Гетерогенность структуры и последовательности между последовательностями SCR и SRK , вероятно, является наиболее важным механизмом подавления рекомбинации и поддержания SI. Этот вывод убедительно подтверждается результатами Castric et al. (2010), которые обнаружили, что рекомбинация могла происходить, когда люди были гомозиготными по рецессивным аллелям, что указывает на отсутствие общего подавления рекомбинации в этой области.Интересно, что коэволюция и сцепление ограничены действительно небольшой областью около SCR и SRK .
Дупликация, преобразование генов, позитивный отбор и эволюция новых специфичностей
Существует несколько гипотез генерации новых специфичностей SI (Uyenoyama et al., 2001; Chookajorn et al., 2004; Charlesworth et al., 2005) . Согласно одной из гипотез (Uyenoyama et al., 2001) создается самосовместимый промежуточный продукт, в котором частичное разрушение SI происходит из-за мутации в одной из детерминант специфичности SI.Последующие компенсаторные мутации в другом детерминанте специфичности затем заставляют пестик отвергать новый тип пыльцы, таким образом восстанавливая систему SI. У ауткроссингового вида A. lyrata в Северной Америке обнаружено много самосовместимых образцов. Следовательно, SC, вероятно, возник несколько раз (Mable et al., 2005; Mable and Adam, 2007; Mable, 2008; Foxe et al., 2010), и эти самосовместимые гаплотипы также могут быть предшественниками новых SI. гаплотипы. Другая модель предполагает, что новые особенности SI возникают в результате постепенного изменения аффинностей SRK-SCR (Chookajorn et al., 2004). Мы обнаружили, что SCR , по-видимому, подвергается гораздо более сильному диверсифицирующему отбору, чем SRK , что согласуется с анализом структуры-функции SCR, который показал, что этот белок необычайно устойчив к изменениям последовательности (Chookajorn et al., 2004), что предполагает что SCR является основным двигателем для модификации сродства SRK-SCR.
Дополнительным фактором может быть преобразование гена, которое было обнаружено в Brassica между SLG и SRK (Sato et al., 2002; Fujimoto et al., 2006) и между SRK и его возможными паралогами в A. lyrata (Charlesworth et al., 2003). Мы идентифицировали события конверсии генов среди SRK , ARK3 и дублированных SRK -подобных (At4g21366) генов. Интересно, что мы обнаружили, что конверсия гена была в значительной степени ограничена частью области, кодирующей киназный домен. Хотя киназный домен белка SRK, по-видимому, не вносит прямого вклада в специфичность распознавания пыльцы / пестика (Rea et al., 2010), это может косвенно влиять на специфичность SRK, влияя на конформацию белка. Кроме того, мы обнаружили, что только три из 11 генов ( SCR , SRK и ARK3 ) в области локуса S демонстрируют доказательства положительного отбора. Предыдущие исследования показали, что многие сайты в S-домене SRK находятся под положительным отбором у этих видов (Sainudiin et al., 2005; Castric and Vekemans, 2007). Мы также обнаружили, что ARK3 , которая представляет собой рецептор-подобную киназу S-домена, наиболее близкую к SRK , имеет историю дупликации генов, конверсии генов и положительного отбора.Эти особенности ARK3 могут быть двигателем для эволюции SRK , учитывая очевидное преобразование генов между ARK3 и SRK , которое мы здесь обнаружили. Таким образом, есть веские основания полагать, что дупликация, генная конверсия и положительный отбор вносят вклад в эволюцию новых специфичностей локуса S , как предполагалось ранее.
Взаимосвязь между локусом
S и самооценкойОдна из гипотез лабильного характера SI заключается в том, что переход от ауткроссинга к самоопылению может обеспечить селективное преимущество в данном месте и времени (Stebbins, 1957; Busch et al., 2010; Goldberg et al., 2010; Райт и Барретт, 2010). Единственный инактивированный гаплотип S -локуса был зафиксирован в C. rubella , что представляет собой ключевой шаг в недавнем переходе к самоопылению для этого вида (Guo et al., 2009). Напротив, SC, по-видимому, несколько раз независимо возникал у Arabidopsis (Bechsgaard et al., 2006; Sherman-Broyles et al., 2007; Tang et al., 2007; Shimizu et al., 2008; Boggs et al., 2009b; Tsuchimatsu et al., 2010). В образцах с Col-0-подобным аллелем SRK , SCR стал псевдогенизированным после того, как ген был нарушен инверсией (Boggs et al., 2009b; Tsuchimatsu et al., 2010). В образце Cvi-0 SCR не поврежден, но SRK имеет усеченную ORF (Tang et al., 2007; Shimizu et al., 2008; эта работа). И SCR , и SRK имеют усеченные ORF в Col-0 (Kusaba et al., 2001). C24, который также имеет усеченную ORF SRK , полностью лишен SCR (Sherman-Broyles et al., 2007). В случае C. rubella ORF всех аллелей SCR и некоторых аллелей SRK усечены (Guo et al., 2009). Интересно, что один гаплотип A. lyrata , Aly-S38, очень похож на C. rubella , с тесно связанным SCR с усеченной ORF и SRK с полной ORF (рис. Рис. S1). Это указывает на то, что усеченный гаплотип локуса S в C. rubella может быть очень старым, несмотря на то, что он был исправлен совсем недавно. Хотя одновременное поддержание как нефункциональных, так и функциональных гаплотипов локуса S происходит редко (Uyenoyama et al., 2001; Porcher and Lande, 2005), два из гаплотипов локуса S , которые мы восстановили для A. lyrata , по-видимому, содержат аллель SCR с усеченной ORF, который охватывает две разные линии локуса S от Arabidopsis и Capsella родственников (дополнительный рис. S1). Было бы интересно исследовать активность этих гаплотипов локуса S с усеченными ORF (таких как Aly-S38 и Aly-S50), учитывая, что ген SCR Cvi может не функционировать, даже если он имеет полную ORF (Boggs et al., 2009а).
К сожалению, последовательности Aly-S38 и Aly-S50 происходят из библиотеки ВАС, созданной десять лет назад, и отдельные растения с этими гаплотипами больше не доступны. Из-за большого разнообразия гаплотипов локуса S найти такие же гаплотипы в существующих образцах было бы очень сложно, если не невозможно. С другой стороны, различие функциональных / нефункциональных гаплотипов локуса S не было основным направлением нашего исследования. Сила нашей работы заключается в том, что, насколько нам известно, это первое исследование секвенирования области локуса S у такого большого числа родственников Arabidopsis.С помощью дополнительных высококачественных последовательностей области локуса S из A. lyrata и других родственных видов можно обратиться к механизмам эволюции области локуса S , определить, являются ли гаплотипы локуса S с усеченными ORF являются функциональными или нет, а также с большей уверенностью решают вопрос о возрасте неактивных S -локусных гаплотипов.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Наши результаты согласуются с предыдущими исследованиями локуса S в том, что мы обнаружили, что два SI-определяющих гена, SCR и SRK , демонстрируют паттерны коэволюции.Дупликация, конверсия генов и положительный отбор были важными факторами в истории эволюции этих двух генов и, по-видимому, вносят свой вклад в создание новых особенностей распознавания. Неожиданный результат состоит в том, что неактивный гаплотип локуса S в SC видов C. rubella может быть старым гаплотипом локуса S , который только совсем недавно стал фиксированным, когда C. Предок SI, Capsella grandiflora .Наконец, наши данные предоставляют не только важный ресурс для понимания эволюции локуса S , но также могут служить ориентиром для будущих функциональных исследований системы SI.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Скрининг ВАС, секвенирование и сборка
Мы создали зонд длиной 400 пар оснований, полученный из PUB8 (At4g21350), путем ПЦР-амплификации Arabidopsis ( Arabidopsis thaliana ) Col10720 с использованием праймеров G ‘-TTAATCTCCACTCTCATCTCTC-3′) и G10721 (5’-CTGATTCCTTTCTCTCCCTATC-3 ‘) и использовали его для скрининга библиотек ВАС Arabidopsis Cvi-0, Arabidopsis lyrata и Capsella rubella путем гибридизации с фильтром. особей A. lyrata , использованных для создания библиотеки ВАС, были из района Печ в Баварии (Германия), а особей C. rubella были из Гаргано, Италия. Конечное секвенирование использовали для картирования границ положительных клонов ВАС, а клоны, которые включают область от At4g21326 до At4g21430, анализировали путем секвенирования с дробовиком.
Для Arabidopsis Cvi-0 был проанализирован BAC35E6 (Ath-Cvi). Для ауткроссинга A. lyrata мы сначала секвенировали часть локуса SRK (с использованием праймера G12957; 5′-CTTCGAGCTTGGTTTCTTCA-3 ‘) для дифференциации различных гаплотипов локуса S .Затем мы использовали эти последовательности SRK и другие доступные последовательности SRK из GenBank для построения филогенетического дерева для различных гаплотипов локуса S . Среди 16 положительных клонов ВАС было три различных гаплотипа локуса S (названных в честь сходства с хорошо известными последовательностями SRK A. lyrata ) помимо Aly-Sb, расположенных на SRKb ВАС A. lyrata , о котором сообщил Кусаба и его коллеги (2001), в дальнейшем представленный как Aly-Sb и Aly-Sa из эталонного штамма MN47 (дополнительный рис.S1). И Aly-Sa, и Aly-Sb происходят от образцов A. lyrata , собранных в Мичигане (Kusaba et al., 2001). В итоге были отобраны четыре независимых клона ВАС A. lyrata , BAC6K22 (Aly-S16), BAC39O17 (Aly-S38), BAC27M5 (Aly-S50) и Aly-Sb (Kusaba et al., 2001). для секвенирования. Из библиотеки C. rubella мы выбрали BAC15P16 (Cru).
ДНКВАС получали с использованием набора для подготовки ДНК большой конструкции (Qiagen), физически разрезали, и библиотеки дробовика были сконструированы с использованием набора для субклонирования TOPO Shotgun (Invitrogen).Клоны дробовика секвенировали на анализаторе ДНК ABI 3730XL с использованием праймеров T7 и SP6. Последовательности обрабатывали с использованием Phred для вызова оснований, CROSS_MATCH для удаления векторных последовательностей и Phrap и Consed для сборки (Ewing and Green, 1998; Ewing et al., 1998; Gordon et al., 1998). Прогулка праймеров и ПЦР использовались для заполнения или полировки пробелов и неоднозначных областей. Последовательности и собранные контиги соответствуют бермудским стандартам секвенирования (http://www.genome.gov/10001812). Область локуса S Col-0 была выделена из эталонного генома Arabidopsis (http: // www.arabidopsis.org/), а область локуса S штамма MN47 A. lyrata была также извлечена из эталонного генома (http://genome.jgi-psf.org/Araly1/Araly1.home .html).
Аннотации последовательностей и филогенетический анализ
Аннотации последовательностей ВАС выполняли с использованием FGENESH (http://linux1.softberry.com/berry.phtml). Аннотация подтверждена сравнением с Arabidopsis (Информационный ресурс Arabidopsis 8). Ген SCR был аннотирован путем сравнения его с SCR1 , SCR2 и SCR3 Arabidopsis (Col-0), SCRa (AB052753) и SCRb (AB052754) A.lyrata , SP11-6 (AF195625) из Brassica oleracea и SP11-9 из Brassica rapa (AB022078). Spidey (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/spidey/) использовался для подтверждения аннотации, основанной на выравнивании с мРНК Arabidopsis, когда это было необходимо. VISTA (http://genome.lbl.gov/vista/index.shtml) и Mummer версии 3.19 (Kurtz et al., 2004) использовались для сравнения и просмотра последовательностей ВАС.
Последовательности выравнивали с использованием ClustalX версии 1.81 (Thompson et al., 1997), а затем уточняли вручную. PAUP * версии 4.0b10 (Swofford, 2003) был использован для реконструкции филогенетического дерева. Для дерева максимальной экономии был выполнен эвристический поиск с опцией MULPARS, перестановка ветвей пополам с пересоединением дерева. Деревья соединения соседей были построены с использованием двухпараметрической модели (Kimura, 1980; Saitou and Nei, 1987). Топологическая надежность оценивалась бутстрэппингом с 1000 повторов (Felsenstein, 1985).
Анализ переносимых элементов
RepeatMasker, версия 3.2.5 (http://www.repeatmasker.org/) использовался для обнаружения содержимого мобильных элементов с использованием библиотеки Arabidopsis Repbase (версия базы данных RM 20080611). LTR_STRUC (McCarthy and McDonald, 2003) был использован для идентификации полноразмерных ретротранспозонов LTR. Каждый ретротранспозон LTR был классифицирован (цыганский, похожий на копию, другие) на основе поисков BLASTN и T-BLAST в базе данных повторов Brassicaceae (http://tigrblast.tigr.org/euk-blast/index.cgi?project= завод. повторения). Расхождение последовательностей между двумя LTR каждого интактного ретротранспозона LTR использовали для оценки времени введения ( T ) по формуле T = K / (2) ( r ), где K — количество замен на сайт между двумя LTR, оцененными с помощью двухпараметрической модели с использованием программы distmat, реализованной в пакете EMBOSS (http: // emboss.sourceforge.net/), а r — это частота спонтанных мутаций, оцененная в Arabidopsis, 7 × 10 -9 мутаций на сайт на поколение (год; Ossowski et al., 2010).
Обнаружение преобразования гена
Преобразование гена анализировали с использованием GENECONV версии 1.81a (Sawyer, 1989) с настройками по умолчанию. Основываясь на выравнивании последовательностей ДНК, GENECONV обнаруживает конверсию генов, ища достаточно одинаково выровненные сегменты между парой последовательностей. Глобальное значение P ≤ 0.05 использовался в качестве критерия для дальнейшего анализа конверсионных трактов, обнаруженных GENECONV. Учитывая, что GENECONV не может различать конверсию генов и неравный кроссинговер, значимые результаты GENECONV указываются как события или участки конверсии (Mondragon-Palomino and Gaut, 2005).
Обнаружение положительного отбора с использованием тестов отношения правдоподобия
Потенциально положительный отбор анализировали с помощью программного кода PAML версии 3.15 (Yang, 1997). Первым шагом было найти сайты с ω (d N / d S )> 1 путем сравнения нулевой модели (M7), которая не допускает сайтов с ω> 1, и общей модели, которая делает (M8) выполнение теста отношения правдоподобия с использованием codeml.Если модель M7 была отклонена в пользу модели M8, мы восприняли это как свидетельство против того, чтобы отношение ω было ограничено интервалом (0, 1) для всех участков. Вторым шагом было использование теста отношения правдоподобия для идентификации остатков (с байесовской апостериорной вероятностью) при положительном отборе с помощью байесовского эмпирического байесовского инструмента (Yang et al., 2005). Мы предположили, что сайты с ω> 1 и высокой вероятностью ( P ≥ 95%), скорее всего, будут находиться под положительным отбором.
Данные о последовательностях из этой статьи можно найти в библиотеках данных GenBank / EMBL под номерами доступа HQ376928-HQ376932 и EF637083.
Дополнительные данные
Следующие материалы доступны в онлайн-версии этой статьи.
Дополнительный рисунок S1. Отбор клонов ВАС для секвенирования дробовика на основе филогении SRK с использованием наиболее экономичного метода.
Дополнительный рисунок S2. Одно самое экономное дерево, основанное на аминокислотных последовательностях гена SCR .
Дополнительный рисунок S3. Филогенетические деревья с использованием метода объединения соседей с двухпараметрической моделью, основанной на кодирующих областях девяти генов, кодирующих белок, фланкирующих локус S , от At4g21326 до At4g21430, и гена SRK для обнаружения трансвидового полиморфизма.
Дополнительная таблица S1. BAC информация и плотность генов.
Дополнительная таблица S2. Повторяющееся содержимое и полноразмерное содержимое ретротранспозона LTR и время вставки.
Дополнительная таблица S3. Содержание переносимого элемента в гаплотипах локуса S .
Благодарности
Мы благодарим Джун Б. Насралла за предоставление клона ВАС A. lyrata Aly-Sb; Маартен Коорнниф за предоставление доступа к библиотеке Cvi-0 BAC; Норману Вартманну, Кирстен Бомблис, Стефану Хенцу и Намите Трипати за технические советы; Стэнли А. Сойеру за полезные предложения по использованию GENECONV для анализа конверсии генов; Бет Роуэн за значительное улучшение рукописи; и Кармен Мельчерс за вычитку.
Сноски
Автор, ответственный за распространение материалов, составляющих выводы, представленные в этой статье, в соответствии с политикой, описанной в Инструкциях для авторов (www.plantphysiol.org): Детлеф Вайгель (weigel {at} weigelworld .org).
www.plantphysiol.org/cgi/doi/10.1104/pp.111.174912
↵1 Эта работа была поддержана ERA-NET на гранте по геномике растений AR Родственники от Deutsch Forschungsgemeinschaft (Д.W.) и Обществом Макса Планка (Д.В.).
↵2 Эти авторы внесли одинаковый вклад в статью.
↵ [C] Некоторые рисунки в этой статье отображаются в Интернете в цвете, а в печатном издании — в черно-белом.
↵ [W] Онлайн-версия этой статьи содержит данные только для Интернета.