Огромный пятиэтажный терминал удобно расположен на 85-м км внешней стороны МКАД.

Центр предоставляет полный спектр услуг по выбору, приобретению, обслу

Полный модельный ряд автомобилей Audi, доступный российским покупателям, представлен в шоу-румах общей площадью более 8 000 кв.м.

Это единственный автоцентр в Москве, где можно во всем блеске увидеть спортивную линейку моделей бренда — Audi RS.

Клиенты центра могут также выбрать и приобрести практически любую модель в рамках программы Audi с пробегом :plus, в которой участвуют автомобили не старше 5 лет с пробегом не более 100 000 км, прошедшие тщательный отбор и получившие гарантию на 12 месяцев со дня покупки.

В Ауди Центре Алтуфьево можно выбрать любой автомобиль из имеющихся в наличии или заказать в производство, получить профессиональные консультации специалистов, определиться в выборе на тест-драйве, подобрать кредитную программу и выгодный тариф страхования, а также воспользоваться услугой trade-in.

Сервисная зона Ауди Центра Алтуфьево занимает 2 000 кв.м и оснащена новейшим оборудованием, соответствующим всем стандартам и техническим требованиям бренда.

10 действующих постов, 10 подъемников позволяют оперативно проводить техническое обслуживание, выявлять и устранять любые проблемы. Кроме того, в техническом центре есть все необходимое для установки дополнительного оборудования. Клиенты сервиса крупнейшего европейского дилерского центра Ауди не знают, что такое очередь на техническое обслуживание и ремонт.

Клиентам Ауди Центра Алтуфьево доступна VIP-программа обслуживания, включающая услуги выделенного специалиста, круглосуточную техническую помощь на дороге, бесплатную эвакуацию автомобиля в случае поломки, предоставление подменных автомобилей и многое другое.

В числе других преимуществ автосалона – уютное кафе, вызов такси для клиентов сервиса, а также прием автомобиля в сервис в день обращения.

• Марки авто

  Opel, Cadillac, Chevrolet, Hummer, Saab

• Наши услуги

  Автозвук, Автостекла, Кузовной ремонт, Техническое обслуживание, Тюнинг, Электрика

• Методы оплаты

• Дополнительные услуги

  • Мойка
  • Выезд к клиенту
  • Склад/запчасти

Дженсер Ясенево: Опель покоряет пространство

Ежегодный рост количества автолюбителей  увеличивает потребность в авторитетных автосалонах, к которым относится Дженсер Ясенево. Опель наряду с другими мировыми брендами имеет большую популярность у автолюбителей, благодаря новшествам, которые постоянно присутствуют в различных моделях.

Любой покупатель сам может убедиться в профессионализме и в высоком уровне сотрудников компании Дженсер в Ясенево. Дилер Опель — Дженсер реализует популярный автомобиль по многим программам, которые делают фирменную машину доступной абсолютно для всех.

Дженсер Ясенево: Опель расширяет границы

Купить современный автомобиль, который станет для автовладельца настоящей реальностью, возможно в компании  Дженсер Ясенево. Опель реализуется здесь часто и успешно, так как предложенные выгодные программы делают автомобиль доступным для всех категорий населения.

Все без исключения модели Опель в компании Дженсер Ясенево Опель предлагаются по следующим программам:

• автокредиты, варианты которых выгодны всем;
• выгодные рассрочки;
• оформление корпоративных программ;
• обмен по программе trade-in;
• прокат или аренда;

Для сотрудников компании Дженсер Ясенево важно, чтобы у покупателей Опель не было никаких проблем с оформлением страховки или регистрации в ГИБДД. Юристы компании сделают всё оформление быстро и качественно.

Дилер Опель: Дженсер выходит в лидеры

Всем известно, что автомобиль требует ухода, обслуживания и технической поддержки, который предлагает дилер Опель. Дженсер подключил ко всем программам сервисного и технического обслуживания.

В качестве дополнительных услуг  дилер Дженсер предлагает следующие виды технического сопровождения Опель:

• слесарный и кузовной ремонт;
• шиномонтаж и балансировку;
• полную и локальную покраску кузова;
• установку дополнительных аксессуаров;
• тюнинг, тонировку;
• гарантийный и постгарантийный ремонт;
• диагностику основных узлов и деталей;
• техническую помощь на дорогах столицы;
• вызов эвакуатора;

Сотрудники  дилера Дженсер рекомендуют всем заинтересованным лицам посетить сайт и приобрести Опель по выгодным предложениям. Кроме того, на сайте есть полная информация о ценах, поступивших моделях, цвете и комплектации автомобилей.

Для компании важно осознавать, что главным принципом работы с клиентом является индивидуальный подход, сотрудничество и партнёрство.

Новые работы скульптора Джиллиан Дженсер из Торонто изображают нашу связь с окружающей средой и друг друга.

Скульптор из Торонто Джиллиан Дженсер создает Ла Пьета (справа). Ее грудь покрыта ракушкой, а сложное брюшко выполнено с прожилками коряг. Слева — ее череп. Джиллиан Генсер / Раздаточный материал

Чтобы по-новому взглянуть на мир, особенно на тот, в котором мы живем, мы можем взглянуть на искусство, которое нас окружает. В моем случае мне нужно было только смотреть через улицу.

Моя соседка, Джиллиан Дженсер, всегда приветствовала меня с распростертыми объятиями в своей студии.Пространство похоже на загадочный музей: шкафы и столешницы загромождены образцами плавников, костей, раковин и кораллов, которые она собирала за долгие годы. Это нервирует, когда тебя окружает столько всего, что когда-то было живым.

Впервые я встретил скульптора много лет назад, когда она постучала в нашу дверь в Этобико, Онтарио, чтобы поговорить о защите ясеня на нашей улице. Ее сад местных растений выделяется как самый очаровательный в нашем квартале. Иногда она роется в нашем районе — она ​​может попросить нас не использовать химикаты для осиновых гнезд, чтобы зимой использовать брошенный панцирь.В других случаях она находит новый материал у поставщиков, пользующихся этическими принципами.

Когда мы познакомились, я не знал, что она художник, я просто знал, что она заботится о деревьях. Но, как я узнал, ее работы получили международную известность и были включены в школьные программы как в США, так и в Бразилии.

Скульптуры г-жи Дженсер вдыхают дух в останки жизни. Ее творения отображают нашу связь с окружающей средой и, в конечном итоге, нашу связь друг с другом. Они сложны и созданы для изучения; под г-жойПод руководством Дженсер, я мог оценить всю их глубину, пока она разбирала части.

Женщина, изображение матери-природы на коленях, держащей свое слабое тело. Раздаточный материал

«Когда мы пытаемся понять жизнь, это означает, что мы пытаемся понять смерть», — фактически говорит она мне. Ей чуть больше шестидесяти, она связывает темные волосы и осторожно подбирает слова. «Сегодня хороший день», — сказала она мне, имея в виду, что у нее ясная голова. Ее работа отчасти является комментарием к ее собственному состоянию, неврологической борьбе, которая, в свою очередь, была вызвана ее искусством.

Быть свидетелем ее работ было деликатным делом, особенно сейчас, когда ее искусство не может быть доступно широкой публике.

Я помню ее волнение пару лет назад, когда она впервые нашла на продажу рога антилоп гну, текстурированные и скрученные с кривизной, напоминающей ноги на коленях. Они идеально подошли бы для ее следующей скульптуры, которую она назвала бы Ла Пьета.

Дыхательная, репродуктивная и кровеносная системы создания сделаны из натуральных материалов, таких как кости и экзоскелеты.Сундук покрыт ракушкой, но посмотрите за нее, и вы увидите сложное брюшко, сделанное из прожилок коряг. Дизайн скульптуры позволяет зрителю вглядеться в тело и увидеть органы Ла Пьеты.

Отключенная голова скульптуры смотрит на собственное тело. Ее легкие сделаны из носовых ходов ягненка, что намекает на воскресение. Ее матка содержит останки пчелы, символ плодородия земли. Ее волосы — осиное гнездо, а сердце — пчелиный улей: тонкие последние послания суеты и бодрости.

Мисс Дженсер создала женщину: изображение Матери-природы на коленях, держащей в руках свое слабое тело.

Разъединенная голова скульптуры смотрит на собственное тело. Раздаточный материал

«Но, возможно, она тоже все мы, смотрящие с сожалением и сожалением на несправедливость и жестокость, совершаемые в теле всего человечества», — объясняет она, кивая в сторону. прошлый год. Скульптура изображает всех нас, пытающихся найти сочувствие, в то время как мы, возможно, разваливаемся по швам.

Но г-жаДженсеру знакомы самоизоляция и болезни — две вещи, которые больше всего изменили наше существование с начала пандемии.

Ее работы стали популярными в 2018 году — в частности, скульптура по имени Адам, созданная из раковин мидий. В результате его создания она теперь живет с отравлением тяжелыми металлами.

Она начала работать над Адамом в 1998 году и провела 15 лет, просеивая тысячи раковин в поисках идеальных, которые соответствовали бы полосатости мускулов его тела, затем измельчила и сформировала их.

Но раковины — это пример биоаккумулирующего организма. В частности, мидии накапливают в своих тканях токсины и химические вещества. Годы работы с ними позволили таким металлам, как мышьяк и свинец, проникнуть в ее поры и легкие. Сейчас она страдает неврологическим повреждением, значительной потерей слуха и необратимыми изнурительными последствиями для психического здоровья.

«Я чувствую, что с каждым произведением я получаю наследство их жизни. Они отдают его мне. Это болезненный подарок, но это подарок.И он был первым, поэтому я получила от него первое болезненное наследство », — говорит она.

Неумышленно она стала частью своей работы, а ее работа стала частью ее.

«Я разрешаю останкам дать мне свой голос, — говорит она, — и им есть что сказать».

La Pieta, созданная скульптором из Торонто Джиллиан Генсер, полностью сделана из натуральных материалов, от рогов антилоп гну для ее ног до осиного гнезда для волос. Работа г-жи Дженсер сделана с целью изучения, позволяя вам заглянуть внутрь Ла Пьеты и обнаружить, что остальные органы фигуры сделаны из других найденных материалов.Видео предоставлено Джиллиан Дженсер.

Раздаточный материал

Четыре выпускника HKS были названы молодыми глобальными лидерами

Всемирный экономический форум выбрал четырех выпускников HKS в качестве членов своего класса молодых глобальных лидеров 2021 года, который включает 112 лидеров из бизнеса, гражданского общества, здравоохранения и правительства. Эти выпускники присоединяются к 36 выпускникам программ HKS, получившим звание YGL с момента создания программы в 2004 году. Всемирный экономический форум, основанный в 1971 году Клаусом Швабом MC / MPA 1967, является международной неправительственной организацией, которая поощряет сотрудничество между государственным и частным секторами. .

выпускников HKS, которые являются YGL на 2021 год, включают Питера Биара Аяка MPA / ID 2009, Анн-Лор де Шаммар MPP 2009, Газаль Калра MPA 2014 и Роберто Патиньо MPP 2015.

Биар Аджак MPA / ID 2009 — лидер гражданского общества, политический диссидент и ученый из Южного Судана, выступающий за права человека и свободные и справедливые выборы. В 2018 году, когда он защищал докторскую диссертацию в Кембриджском университете, он был задержан и осужден в ходе политически мотивированного судебного процесса и заключен в тюрьму на 18 месяцев в печально известной тюрьме Голубой дом Южного Судана.В январе 2020 года международный адвокат по правам человека Джаред Генсер MPP 1998 HKSEE 2009 добился его освобождения, а тем летом помог Аджаку и его семье сбежать из отряда смерти, приказанного президентом Южного Судана. Аджак — научный сотрудник Рейгана-Фаселла по вопросам демократии в Национальном фонде за демократию, научный сотрудник архиепископа Десмонда Туту, стипендиат тысячелетия Атлантического совета и приглашенный научный сотрудник Африканского центра стратегических исследований Университета национальной обороны. Он также является председателем Форума молодых лидеров Южного Судана, старшим советником Международного центра роста Лондонской школы экономики и основателем Центра стратегического анализа и исследований в Джубе.Ранее он был старшим советником министра национальной безопасности в канцелярии президента Южного Судана и экономистом Всемирного банка по стране.

Anne-Laure de Chammard MPP 2009 — руководитель группы по стратегии и инновациям в ENGIE Group, организации с 170 000 сотрудников, которая обеспечивает низкоуглеродную энергию и услуги для решения чрезвычайных ситуаций, связанных с изменением климата. Она начала свою карьеру в Boston Consulting Group, затем присоединилась к Министерству устойчивого развития и энергетики Франции, где руководила крупными инфраструктурными проектами государственно-частного партнерства.В 2014 году де Шаммар присоединилась к Bureau Veritas Group в качестве генерального менеджера по Восточному региону Франции, а в 2016 году стала президентом и главным исполнительным директором Bureau Veritas Construction. В 2019 году она присоединилась к ENGIE, чтобы возглавить стратегию группы по переходу на нулевой углерод. Она также увлечена оперой, она записывалась и пела на концертах.

Gazal Kalra MPA 2014 соучредителем Rivigo в 2014 году. Компания — стартап в области технической логистики в Индии, цель которого — сделать логистику более человечной, быстрой, безопасной и более эффективной — использует «ретрансляционные грузовые перевозки» для решения проблемы нехватки водителей грузовиков. а также предоставить рабочие места в отдаленные районы, помогая водителям грузовиков проводить меньше времени в дороге и больше проводить с семьями.В 2019 году Fortune India включила Калру и ее соучредителя в свой список «40 до 40». Она начала свою карьеру в McKinsey & Co. и занимала должности в Фонде общественного здравоохранения Индии, Группе Всемирного банка и Парламенте Индии.

Роберто Патиньо MPP 2015 — венесуэльский социальный предприниматель, борец за демократию и права человека. Он основал две неправительственные организации, в том числе Mi Convive, цель которой — разорвать порочный круг насилия и мести в Каракасе, и Alimenta la Solidaridad, которая помогает малообеспеченным семьям прокормить своих детей. Венесуэла ухудшилась.Патиньо, эксперт в области безопасности граждан, ведения переговоров и разрешения конфликтов, является членом правления Primero Justicia, политической партии, и Bangente, банка развития. Он бывший лидер студенческого движения Венесуэлы.

Портсмут, Вирджиния Ежедневная сводка

Сегодня в Портсмуте!

Хотя PWRS находится на этом месте всего 22 года, его основатель находится в этом районе уже 44 года.В то время великая буря Пепельная среда 1960-х годов была самым сильным продолжительным ветром и наводнением. С тех пор норд-пасхи приходили и уходили, но нынешний, вероятно, второй по серьезности по сравнению с Бурей Пепельной среды.

День начался со строительного ветра с востока и юго-востока. К середине утра ветер дул до 70 миль в час в туннеле моста через Чесапикский залив с меньшими порывами, когда кто-то двигался на запад от туннеля. Ветер здесь, в Портсмуте, дул со скоростью 48 миль в час с юго-востока в 11:45 EST.До конца дня продолжались сильные восточные ветры.

Полосы ливней двинулись сначала с юга, затем с юго-юго-востока на закате с шквалистой погодой в то время. Между 16:35 и 17:10 над станцией прошла молния из облака на землю. Количество осадков за день составило 3,86 дюйма, а добавление к предыдущему количеству за день привело к сумме шторма 4,03 дюйма.

Продолжительные, устойчивые береговые ветры и проливные дожди в совокупности привели к умеренным наводнениям во второй половине дня в подверженных наводнениям районах Хэмптон-Роудс, включая Песчаный мост на восточном берегу Вирджиния-Бич и низменные районы вокруг притоков рек Норфолк и Портсмут.Сильное наводнение должно было произойти в четверг утром с уровнем наводнения примерно на 7,1 фута выше средней отметки минимума воды, что вызвало сильное наводнение в обычных районах.

Большинство школ было закрыто, а некоторые школы, расположенные в глубине страны, открылись с задержкой.

Градус нагрева дней = 16.5

Ежедневное количество осадков = 3,86 дюйма

Наивысшая относительная влажность = 97% в 23:59

Барометр: максимум 29,798 дюйма в 12: 01:00 Минимум 29,198 дюйма, 21:00

Максимальный порыв ветра составил 48 миль в час в юго-восточном направлении в 11:45.

Returnto PWRS ‘База данных Страница

Returnto PWRS’ Домашняя страница

Сын требует от Ирана освободить больного отца для оказания срочной медицинской помощи

ВАШИНГТОН (AP) — сын американца иранского происхождения, который содержится в Иране более пяти лет. Годы потребовали немедленного освобождения его отца в понедельник, чтобы он мог получить неотложную и потенциально жизненно важную операцию.

Бакеру Намази, 84 года, требуется операция в течение нескольких дней, чтобы устранить серьезную закупорку главной артерии, которая снабжает кровью его мозг, по словам его сына Бабака и адвоката семьи Джареда Генсера.

«Мой отец уже потерял столько драгоценного времени. Я умоляю Иран позволить ему проводить оставшееся у него небольшое количество времени со своей семьей », — сказал Бабак Намази репортерам в понедельник, призвав Иран отменить запрет на поездки, из-за которого его отец оставался в стране.

Намази-старший, бывший представитель ЮНИСЕФ и имеющий двойное гражданство США ирано-американского происхождения, был задержан в 2016 году, когда он ехал в Тегеран, чтобы увидеться со своим сыном Сиамаком Намази, бизнесменом, арестованным в Иране несколькими месяцами ранее. Оба намази были приговорены к 10 годам тюремного заключения в Иране по сфабрикованным обвинениям в шпионаже.

Бакеру Намази был предоставлен отпуск по медицинским показаниям в 2018 году, и его приговор был впоследствии заменен отбытием срока, но иранские власти не разрешили ему покинуть страну.Сиамак Намази по-прежнему находится в печально известной иранской тюрьме Эвин, и Бабак Намази в понедельник повторил свои требования об освобождении своего брата.

Врачи Бакера Намази сказали, что ему нужна операция в течение семи-десяти дней, чтобы избежать потенциально катастрофического инсульта, сказал его сын. Сторонники Намази заявили о своих требованиях Ирану, но также добиваются прямого вмешательства со стороны Белого дома президента Джо Байдена.

Команда юристов обратилась за помощью в понедельник в U.Н. Специальный докладчик по вопросу о праве на здоровье пишет в подробном документе, что «из-за серьезности его медицинских проблем Бакер особенно сталкивается с высоким риском смерти, если Иран быстро не изменит курс».

«Время для максимальных усилий прошло», — сказал Генсер репортерам. «Пришло время действовать».

Позже в тот же день официальный представитель Госдепартамента Нед Прайс заявил, что администрация Байдена неоднократно выражала Ирану озабоченность по поводу «американцев и других иностранных граждан, которых несправедливо удерживают против их воли.А госсекретарь Энтони Блинкен написал в Твиттере, что Иран должен позволить Намази «обратиться за медицинской помощью, необходимой для спасения его жизни».

Блинкен добавил: «Прошло почти шесть лет с тех пор, как он видел своих детей. В такое время его должна окружать вся его семья ».

Защитники Намази-старшего говорят, что они отчаянно нуждаются в том, чтобы его лечили за пределами Ирана, учитывая, насколько перегружены больницы лечением пациентов с COVID-19 и риск, который представляет для его здоровья.По словам Бабака Намази, если ему не разрешат уехать в течение нескольких дней, его отцу придется пройти операцию в Иране — сценарий далеко не идеальный.

«Если между ним и смертью, и не смертью, конечно, это вариант», — сказал Бабак Намази.

___

Следите за сообщениями Эрика Такера в Twitter: http://www.twitter.com/etuckerAP

BERTRAND, ELIETTE M. (DUBE) — Хартфорд Курант

BERTRAND, Элиетт М.(Дубе)

Элиетт М. (Дубе) 76-летняя Бертран из Манчестера, любимая 50-летняя жена Поля Бертрана, мирно скончалась в своем доме в четверг (24 ноября 2005 г.). Родилась в Сент-Ноэле, Квебек, Канада, она была дочерью покойного Пьера и Мари-Анны (Родительницы) Дюбе. Она иммигрировала в Соединенные Штаты в 1951 году, а затем стала гражданином США в 1966 году. В последнее время она жила в Манчестере, а до этого много лет жила в Гластонбери. Чтобы сохранить теплые воспоминания о своей жизни, она оставляет позади своего мужа Пола; ее сын, Стивен и его жена, Марта и их дети, Шейла, Остин и Коул.Дочь, Морин и ее муж, Стефан Сент-Аманд и их дети, Захари, Тайлер и Люк. И сын Карл Бертран из Манчестера. Она нашла счастье в своих внуках, сыгравших значительную роль в ее жизни, которые нежно называли ее «Мими». Она также оставляет после себя пять сестер: Бриджит и ее муж Луи Левеск, Попун и ее муж Раймон Отис, Шарлотту и ее муж Дени Рикар, Люсиль и ее муж Роджер Лепин, Полин Дьюб; и брат Жиль Дюбе и его жена Люсетт из Квебека, Канада; и его зятья и невестки, Патрик и Алиса Бертран из Ньюингтона, Клодетт и Марсель Друэн из Восточного Хартфорда.Она также оставляет после себя племянников и племянников, которых слишком много, чтобы упоминать их по имени. До выхода на пенсию она много лет была казначеем компании Central Drywall. Она была активным членом ассоциации Canado-Americaine. Помимо времяпровождения с семьей, ее любимым занятием было шитье. Семья хотела бы выразить особую благодарность доктору Стюарту Гензеру, доктору Джону Руссомано и Ди Рендок, APRN, которые предоставили ей комфорт и заботу. Друзья и семья могут зайти в похоронное бюро Mulryan, 725 Hebron Ave., Гластонбери, понедельник, 28 ноября, с 14 до 16 и с 19 до 21. Христианская месса состоится во вторник, 29 ноября, в 10 часов утра в церкви Святого Данстана, 1345 Манчестер Роуд, Гластонбери. Похороны будут совершены на кладбище Святого Креста в Гластонбери. Мемориальные взносы могут быть сделаны в American Lung Assoc., 45 Ash St., East Hartford 06108, или в American Diabetes Assoc., 306 Industrial Park Rd., Suite 105, Middletown CT 06457.

Трансплантация пуповинной крови и цитомегаловирус : посттрансплантационная инфекция и скрининг доноров | Кровь

Несмотря на эффективную противовирусную терапию, цитомегаловирус (ЦМВ) остается одной из ведущих причин заболеваемости и смертности после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (ГСК). ^1,2 ЦМВ-инфекция у реципиентов трансплантата может возникать в результате реактивации латентной инфекции или в результате вновь приобретенных инфекций с донорской кровью, тканью или органами в качестве источника вируса. ^3,4 Таким образом, правила Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) в отношении соответствия критериям отбора доноров требуют тестирования доноров жизнеспособной, богатой лейкоцитами крови и HSC на «доказательства инфекции, вызванной цитомегаловирусом». ⁵ Для доноров стволовых клеток костного мозга или периферической крови скрининг основывается на традиционных серологических методах обнаружения ЦМВ-общих антител, поскольку их присутствие (обнаруженное более чем у половины взрослых доноров костного мозга в США) указывает на активное или латентная инфекция, любая из которых может передаваться реципиентам трансплантата. ^6,7 Пуповинная кровь (CB), все более распространенная альтернатива трансплантатам костного мозга, имеет низкий риск передачи ЦМВ из-за низкой частоты врожденной ЦМВ-инфекции (сообщается в 0,2–2,5% США). рождений). ^8-10 Однако на сегодняшний день ни в одном исследовании не проводилась систематическая оценка риска ЦМВ-инфекции у реципиентов трансплантата ХБ или оценивалась эффективность методов скрининга доноров ХБ в этом контексте.

Варианты скрининга на ЦМВ для доноров ХБ включают (1) серологическое тестирование матери младенца-донора для выявления риска инфекции у младенца, (2) серологическое тестирование ХБ ребенка, (3) обнаружение инфекции у младенца вирусным путем. культура или ДНК-специфическая полимеразная цепная реакция (ПЦР) ЦМВ для обнаружения последовательностей нуклеиновых кислот ЦМВ или (4) комбинация серологического тестирования и выявления инфекции у младенца.Интерпретация данных, полученных только серологическими методами, у доноров ХБ затруднена из-за активного транспорта материнских антител IgG через плаценту. Таким образом, положительный результат на ЦМВ – общие антитела у матери или при ХБ обычно отражает воздействие ЦМВ на всю жизнь матери и потенциальный риск, но не обязательно инфицирование младенца. Антитела CMV – IgM (IgM anti-CMV) у матери во время рождения ребенка, как маркер недавней активной инфекции CMV, должны указывать на повышенный риск инфицирования младенца.В некоторых исследованиях сообщается, например, что до одной трети матерей с первичной инфекцией ЦМВ во время беременности передают вирус плоду. ¹¹ IgM anti-CMV остается обнаруживаемым только в течение 4–6 месяцев, поэтому тестирование матери во время родов обычно не позволяет выявить инфекции, которые произошли на ранних сроках беременности. Более того, младенцы могут заразиться ЦМВ, когда латентная материнская инфекция реактивируется во время беременности, и анти-ЦМВ IgM у этих матерей могут оставаться отрицательными или быть положительными только на короткое время.Учитывая эти ограничения, может быть неоправдано, что некоторые банки CB принимают или исключают единицы CB на основании статуса матери по CMV-IgM. ¹² Выявление ЦМВ-инфекции у младенца может быть предпринято более непосредственно, путем тестирования крови ребенка на антитела IgM, культивирования мочи или слюны на наличие вируса или тестирования крови, мочи или слюны на ДНК ЦМВ путем амплификации нуклеиновых кислот. Однако антитела IgM не обнаруживаются у большинства инфицированных младенцев. ¹⁰ Хотя выделение вируса путем посева мочи или слюны считается золотым стандартом для выявления врожденной ЦМВ-инфекции, культивирование вируса может быть обременительным и дорогостоящим и поэтому может оказаться непрактичным для крупномасштабного скрининга. ¹³ Полимеразная цепная реакция (ПЦР) может обнаруживать ДНК ЦМВ у врожденно инфицированных младенцев, но не была широко оценена для скрининга CB. ^14,15

Мы провели текущее исследование для оценки частоты посттрансплантационной ЦМВ-инфекции у реципиентов ХБ, сданных в Национальную программу пуповинной крови (NCBP) Нью-Йоркского центра крови (NYBC), и актуальности серологических тестов доноров у матери как индикаторов риска ЦМВ. передачи реципиентам, а также для оценки возможных стратегий выявления доноров ХБ, инфицированных ЦМВ.

IgM к CMV (IgM anti-CMV) было обнаружено с помощью иммуноферментного анализа микрочастиц (MEIA, система IMx; Abbott Laboratories, Abbott Park, IL). В соответствии с инструкциями производителя результаты были разделены на отрицательные, сомнительные или положительные. Материнская плазма, собранная до марта 2002 г., регулярно тестировалась на анти-CMV IgM (n = 11 726). Общие антитела к ЦМВ (общие анти-ЦМВ) в материнской плазме определяли с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) на IgG, IgM и IgA (ABBOTT CMV TOTAL AB EIA; Abbott Laboratories).Все матери, родившие в период с февраля 1993 г. по ноябрь 1997 г. и с июня 2001 г. по сентябрь 2005 г., были протестированы на общий анти-ЦМВ (n = 19 757). В дополнение к рутинному анализу образцы от матерей, чьи младенцы были положительными или были отобраны в качестве контроля в исследованиях случай-контроль, а также от матерей младенцев, чей CB был использован для трансплантации, были ретроспективно протестированы на IgM и общий анти-CMV, если еще не регулярно тестируется. Предполагалось, что матери, которые были положительными по общему анти-CMV, но отрицательными по IgM анти-CMV, имели преимущественно антитела IgG и в дальнейшем называются «положительными по IgG».«Те, у кого были обнаружены IgM анти-CMV, назывались« IgM-положительными ». Титр антител к ЦМВ определяли на основании положительности конечной точки при 2-кратных серийных разведениях. Единицы CB от матерей с IgM или IgG анти-CMV не исключались из инвентаризации.

В период с августа 1993 г. по декабрь 2004 г. 1564 пациентам была проведена трансплантация с использованием отдельных аппаратов CB, предоставленных NCBP. Центры трансплантации сообщили характеристики пациентов и данные об исходах для 1490 (95%), из которых 1279 имели данные как о предтрансплантационном статусе анти-ЦМВ, так и о посттрансплантационной ЦМВ-инфекции.Отчеты о результатах, включая информацию о посттрансплантационной инфекции, обычно получают через 3, 6 и 12 месяцев после трансплантации, а затем ежегодно. Среди них 1221 имели результаты материнского анти-CMV донора и были оценены на предмет доказательства их связи с частотой посттрансплантационной инфекции CMV у реципиентов CB. Анти-ЦМВ-статус реципиента до трансплантации был классифицирован как положительный, отрицательный или неоценимый. В последнюю категорию вошли пациенты с наследственными иммунодефицитными заболеваниями или перенесшие трансплантацию в первые месяцы жизни, когда положительные антитела, скорее всего, имели материнское происхождение.Предполагалось, что пациенты, чьи антитела к ЦМВ не были оценены до трансплантации, ранее не были инфицированы ЦМВ, и были сгруппированы вместе с пациентами с отрицательными антителами при анализе результатов трансплантации. Большинство центров трансплантации проводят мониторинг ЦМВ-инфекции путем еженедельного тестирования реципиентов на антигенемию или, в последнее время, на ДНК ЦМВ с помощью ПЦР до дня +100 и дольше, если у реципиента диагностирована острая болезнь трансплантат против хозяина (РТПХ). В этом исследовании посттрансплантационная инфекция ЦМВ определялась как любой положительный тест на антигенемию или ДНК ЦМВ с началом в качестве даты первого обнаружения (зарегистрировано в 90% случаев).ЦМВ-инфекция была далее классифицирована как легкая при обнаружении только в крови или как более тяжелая при обнаружении в других тканях или органах или связанная с заболеванием.

Отобранные праймеры для «собственной» ПЦР были направлены в область гликопротеина B (GlyB) из генома CMV человека длиной 280 п.н. ¹⁹ Экстрагированную ДНК (10 мкл) добавляли к смеси для ПЦР (25 пмоль каждого праймера, 1 × буфер для ПЦР [10 мМ Трис-HCl, pH = 8; 50 мМ KCl; 10 мМ NaCl], 6 мМ MgCl. ₂ , Taq Gold, 5U [Perkin Elmer, Norwalk, CT], dUTP 1 × [Sigma, St Louis, MO], бычий сывороточный альбумин [BSA; 0.2 мг / мл; Roche, Indianapolis, IN] и ДНК-гликозилазы урацила [0,25 ед.]), Чтобы получить конечный объем 50 мкл. Амплификацию проводили в термоциклере Gene Amp 9600 (Perkin Elmer, Shelton, CT) следующим образом: выдержка при 25 ° C и 94 ° C в течение 10 минут, соответственно, с последующими 40 циклами при 94 ° C, 56 ° C, и 72 ° C в течение 40 секунд каждый. В конце реакции проводили цикл выдержки при 72 ° C в течение 5 минут.

Отрицательный, положительный и холостой контроль были включены в каждую реакцию.Отрицательным контролем были здоровые взрослые, у которых была отрицательная серология на ЦМВ, а пустой контроль состоял из стандартных реагентов ПЦР без образца ДНК. CMV-положительные контроли с высоким и низким уровнем копий (vc) получали из исходного материала (10000 vc / мкл; Advanced Biotechnologies; Columbia, MD). Продукты ПЦР визуализировали электрофорезом в геле бромистого этидия через 2% агарозу в буфере 1 × TBE (1 М Трис, 0,9 М борная кислота, 0,01 М ЭДТА; Invitrogen, Карлсбад, Калифорния) и подтверждали гибридизацией со специфическими зондами.Для обнаружения образцов, содержащих ингибиторы ПЦР, последовательность ДНК (общий HLA-DRB1; 240 п.н.), которая не имеет гомологии с CMV, была коамплифицирована в качестве контрольной мишени с использованием мультиплексной ПЦР вместе с праймерами для CMV. Чтобы прогон считался действительным, должен присутствовать контрольный диапазон DRB1. Образец без амплификации праймеров CMV в допустимом опыте был интерпретирован как отрицательный CMV-PCR.

Для вложенной ПЦР 2 мкл продукта ПЦР добавляли к смеси, содержащей 0.36 мкМ каждого праймера, 1 × буфер для ПЦР, 6 мМ MgCl ₂ , Taq Gold, 5U (Perkin Elmer, Norwalk, CT), BSA (0,2 мг / мл; Roche) и dUTP 1 × (Sigma) в 50 Конечный объем мкл. Конкретные последовательности праймеров, внутренние по отношению к исходным последовательностям GlyB длиной 280 п.н., были следующими: прямой 5’aggtgctgcgtgatatgaacg3 ‘и обратный 5′-gacaacgaaatcctgttgggc-3’. Амплификацию ДНК проводили следующим образом: выдержка при 94 ° C в течение 10 минут, затем 25 циклов при 94 ° C, 56 ° C и 72 ° C в течение 30 секунд и цикл выдержки при 72 ° C в течение 5 минут.

оценивали гибридизацией с использованием 5′-биотинилированных специфических зондов (Qiagen, Бостон, Массачусетс) с сигналом, полученным с использованием хемилюминесцентной системы (ECL; Amersham Pharmacia Biotech, Бакингемшир, Англия). Каждая мембрана содержала 10-кратные разведения коммерческого положительного контроля ДНК ЦМВ (диапазон 1-5000 об.), А также отрицательного и холостого контролей, как описано выше.

Характеристики реципиентов трансплантата вместе с их серологическим статусом по ЦМВ до трансплантации показаны в таблице 1.Распространенность ЦМВ-антител увеличивалась с возрастом пациентов и чаще встречалась у реципиентов, которые не были белыми, и у пациентов, перенесших трансплантацию в центрах за пределами США или недавно перенесших трансплантацию. Более низкая распространенность среди пациентов с генетическими заболеваниями отражает их более молодой возраст, тогда как более высокая распространенность антител среди пациентов, недавно перенесших трансплантацию, отражает увеличение доли пожилых реципиентов в последние годы. Не было никакой связи между серологией CMV пациента перед трансплантацией и серологией CMV матери донора CB (данные не показаны).Всего в первый год после трансплантации было зарегистрировано 221 инфекцию ЦМВ. Частота ЦМВ-инфекции составила 23% в целом, 8% среди пациентов, у которых не было обнаружено антител против ЦМВ или которые не были оценены до трансплантации, и 41% среди пациентов с положительными антителами ( P <0,001). В пределах этих 2 категорий пациентов не было никакой связи между статусом материнских антител к ЦМВ у донора ХБ и частотой посттрансплантационной инфекции ЦМВ (рис. 2A-B). Заболеваемость ЦМВ-инфекцией после трансплантации была связана с серологией ЦМВ перед трансплантацией реципиента, этнической принадлежностью, возрастом, несоответствием HLA, центром трансплантации и годом трансплантации, но не с серологией доноров по материнской ЦМВ.В многофакторном анализе возраст реципиента больше не был значимым, а серологические данные по материнскому ЦМВ донора оставались незначительными (таблица 2). Из трансплантированных единиц CB 2 были положительными с помощью CMV-PCR: в 1 случае донор имел положительный результат посева слюны, и общий анти-CMV у матери был положительным, но IgM был отрицательным. У серонегативного реципиента была инфекция ЦМВ на +45 день после трансплантации, которая разрешилась после лечения ганцикловиром. Во втором случае материнский IgM анти-CMV был положительным, но посев слюны не проводился.Реципиент в этом случае был серопозитивным до трансплантации и умер от бактериального сепсиса на 52-й день, не выявив ЦМВ-инфекции до момента смерти. Все другие единицы CB, предоставленные для трансплантации исследуемым реципиентам, были отрицательными по результатам ПЦР. Удаление 2 реципиентов, получивших CB, которые были положительными по CMV-PCR, не повлияло существенно на результат многофакторного анализа (данные не показаны).

Характеристики реципиента пуповинной крови и серология на ЦМВ перед трансплантацией